MG/MGY培养基配制方案
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2026-07-24
最小甘油基础培养基 Minimal Glycerol Medium（MG/MGY）是酵母表达体系中常用的基础培养基之一，广泛应用于毕赤酵母等甲醇诱导型表达系统中的菌株活化、转化子扩增、诱导前菌体培养及表达前样品准备。其核心原理是以甘油作为主要碳源，并配合无氨基酸酵母氮源、无机盐、维生素等基础营养组分，为酵母细胞提供成分明确、背景可控的生长环境，使菌体在进入甲醇诱导阶段前保持良好的生长状态和代谢活性。与以葡萄糖为碳源的MD培养基不同，MG/MGY培养基更适合作为甲醇诱导表达前的过渡培养体系，可减少葡萄糖对甲醇诱导相关启动子的潜在抑制影响；与MM等甲醇诱导培养基相比，MG/MGY更侧重于菌体扩增和状态准备，而非直接诱导目的蛋白表达。
永利3044集团官网围绕酵母MG/MGY培养基配制场景，提供从YNB、甘油、琼脂、无菌去离子水到相关耗材的配套产品组合。依托优质原料、精准配比、严格生产质控和稳定批次表现等优点，相关产品已被多篇高水平科研论文采用。您可参考永利3044集团官网配套方案快速完成MG/MGY培养基的标准化配制，减少多品牌混配带来的批次差异、组分不匹配和操作误差，提升酵母诱导前培养、菌体扩增及后续表达实验的稳定性、重复性和结果可靠性。最小甘油基础培养基Minimal Glycerol Medium（MG/MGY）
Minimal（最小/基础）：仅保留酵母生长必需的无机盐、维生素、无机氮源、碳源，不含任何游离氨基酸、腺嘌呤、尿嘧啶，营养组分极简、明确、无冗余。
Glycerol（甘油）：以甘油作为唯一碳源，可高效支持毕赤酵母高密度生长，同时强抑制AOX1甲醇诱导启动子，避免蛋白提前表达，保证菌体只增殖、不诱导，是诱导前种子扩增的专属碳源。
核心设计目的：作为毕赤酵母营养缺陷型菌株诱导前扩增专用基础培养基，用于重组菌株种子液富集、菌体大量增殖。
1. Minimal Base（基础骨架）
核心原料：
含硫酸铵无氨基酸YNB（60901ES）+甘油（714401ES）
YNB：提供无机盐、维生素、硫酸铵无机氮源，无任何游离氨基酸、腺嘌呤、尿嘧啶，营养背景干净；
甘油：专属增殖碳源，支持菌体快速扩增、抑制毕赤酵母启动子AOX1；
固体MGY培养基可额外添加琼脂作为凝固剂。
2. 必需微量因子（生物素）
毕赤酵母自身无法合成生物素，MG培养基必须添加微量D-生物素（60338ES），是菌体正常分裂增殖的必需辅助因子，不可省略。
液体培养基配制：
1. 取100mL无菌去离子水，溶解13.4g YNB（60901ES）再加入0.01mgD-生物素（60338ES）和10 mL甘油（714401ES）
注：可以提前配制500×生物素母液（200 mg/100 mL），每升培养基加0.05 mL母液替代直接称取微量粉末，减少误差
2. 补水定容至1000 mL，搅拌完全溶解
3. 121℃高压灭菌20 min
4. 无菌分装，4℃保存备用
5. 若需要培养HIS4缺陷菌株，则需加入20 mg组氨酸（718435ES）
固体培养基配制：
1. 取100mL无菌去离子水，溶解13.4g YNB（60901ES）再加入0.01mgD-生物素（60338ES）和10 mL甘油（714401ES）
注：可以提前配制500×生物素母液（200 mg/100 mL），每升培养基加0.05 mL母液替代直接称取微量粉末，减少误差
2. 补水定容至500 mL，搅拌完全溶解
3. 121℃高压灭菌20 min，50–70℃水浴保温防凝固（A液体）
4. 用500 mL无菌去离子水（60168ES）溶解20 g琼脂粉（B液体）
5. 高压灭菌后50–70℃水浴备用
6. AB液体按照1:1充分混合后倒平板
7. 室温凝固后4℃保存
1. 甘油可耐高温灭菌：甘油性质稳定，可与培养基基础组分一同高压灭菌，无需过滤除菌，操作比葡萄糖更简便。
2. 普通重组转化子（携带HIS4互补质粒）无需额外补组氨酸；
3. 纯his4缺陷空菌、未转化菌株培养时，必须添加20 mg/L组氨酸，否则菌体无法增殖；
4. 如需长期传代扩增缺陷株，建议每次新鲜配制时补加组氨酸，避免生长停滞;
5. 毕赤酵母无法自主合成生物素，缺失生物素会导致生长缓慢、生物量极低。
Q1：为什么MG/MGY中使用甘油作为碳源？
A1：甘油是毕赤酵母较常用的非发酵型碳源之一，可以支持菌体较好生长，同时相比葡萄糖，对甲醇诱导型启动子的抑制作用通常更小。因此，在甲醇诱导型表达体系中，常先使用甘油培养基扩增菌体，再转入甲醇培养基进行诱导表达。
Q2：MM和MG/MGY培养基有什么区别？
A2：MM培养基碳源为甲醇，用于诱导目的蛋白表达；MG/MGY培养基为甘油，用于诱导前菌体扩增。通常实验流程是：
先用MG/MGY培养菌体，使菌体达到较好的生长状态，再收集菌体并转入MM中，用甲醇诱导目的蛋白表达。
Q3：MG和MGY是同一种培养基吗？
A3：不同厂家、不同实验体系中命名可能略有差异。一般来说，MG/MGY都指以甘油为主要碳源的最小基础培养体系，但具体配方中是否包含YNB、生物素、氨基酸或其他补充成分，需要以产品说明书为准。
Q4：MG/MGY培养后菌体生长不好，可能是什么原因？
A4：常见原因包括：菌株活性差或保存时间过长；接种量过低；培养温度或摇床转速不合适；培养基配方或pH不合适；生物素等关键组分缺失；甘油浓度异常；培养基污染；菌株本身对甘油利用能力较弱；转化子负担较大，导致生长变慢。可以从菌株活化、培养基配制、接种量、培养条件和污染情况几个方面逐步排查。
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产品货号 |
产品名称 |
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Yeast Nitrogen base 酵母氮源基础 |
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D(+)-Glucose,anhydrous D(+)-无水葡萄糖 |
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Glycerol 甘油酯，甘油，丙三醇 |
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L-Histidine L-组氨酸 |
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SterileDeionizedWater(PCRGrade)无菌去离子水(PCR级) |
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DistilledWater蒸馏水 |
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针头式过滤器，0.22µm，PES，25mm，灭菌 |
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培养基全称 |
适用菌株/实验场景 |
培养基制备方案 |
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Synthetic Dropout Medium 合成缺陷培养基（SD） |
酵母单/双杂交实验、基因互补实验，用于单质粒转化验证、共转化验证、蛋白互作功能初筛等 |
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Regeneration Dextrose Medium 再生葡萄糖培养基（RD） |
毕赤酵母原生质体转化实验，用于原生质体复苏再生、转化子选择性培养、阳性转化单克隆分离筛选 |
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Minimal Dextrose Medium 最小葡萄糖基础培养基（MD） |
毕赤酵母表达菌株构建、转化子初筛、表型鉴定、菌株保藏，适配 GS115、X33 等多种常用毕赤酵母菌株 |
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Minimal Glycerol Medium 最小甘油基础培养基（MG/MGY） |
毕赤酵母重组菌株种子液活化与富集、诱导前菌体大量增殖，为后续蛋白诱导表达准备高活性菌体 |
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Minimal Methanol Medium 最小甲醇基础培养基（MM） |
毕赤酵母外源蛋白诱导表达、Mut表型鉴定、缺陷型菌株转化子筛选，适配多种常用毕赤酵母菌株 |
细菌培养相关专题详见官网：
