MD培养基配制方案
10
2026-07-24
最小葡萄糖基础培养基Minimal Dextrose Medium（MD）是酵母遗传转化和基础培养中常用的最小培养基之一，广泛应用于酵母转化子初筛、阳性克隆培养、菌落生长观察及葡萄糖条件下的基础生长实验。其核心原理是以葡萄糖作为主要碳源，并配合无氨基酸酵母氮源、无机盐、维生素等基础营养组分，为酵母细胞提供成分明确、背景可控的生长环境。与 YPD 等复合培养基不同，MD 培养基不含酵母提取物、蛋白胨等天然复杂成分，具有配方清晰、实验背景低、结果重复性强等特点，尤其适用于对培养体系稳定性、转化子筛选准确性和实验可重复性要求较高的酵母分子生物学实验。
永利3044集团官网围绕酵母MD培养基配制场景，提供从YNB、葡萄糖、琼脂、生物素、无菌去离子水到相关耗材的配套产品组合。依托优质原料、精准配比、严格生产质控和稳定批次表现等优点，相关产品已被多篇高水平科研论文采用。您可参考永利3044集团官网配套方案快速完成MD培养基的标准化配制，减少多品牌混配带来的批次差异、组分不匹配和操作误差，提升酵母培养、转化筛选及后续实验结果的稳定性、重复性和可靠性。
最小葡萄糖基础培养基Minimal Dextrose Medium（MD）
Minimal（最小/基础）：仅保留酵母生长必需的无机盐、维生素、无机氮源、碳源，不含任何游离氨基酸、腺嘌呤、尿嘧啶，营养组分极简、明确、无冗余。
Dextrose：葡萄糖作为培养基唯一碳源；
核心设计目的：MD培养基适配多种缺陷标记筛选，既可以筛选his4标记，也可以筛选ade2标记，适用菌株范围广泛，包括GS115、X33、KM71、SMD1168、PichiaPink strain等常用毕赤酵母菌株。未转化携带对应互补质粒的缺陷型酵母无法自主合成所需营养因子，在MD培养基中不能生长，仅成功转化的重组菌株可正常存活，是毕赤酵母表达菌株构建、转化子初筛、菌株保藏的核心基础培养基。
液体培养基配制：
1. 用1000 mL无菌去离子水溶解以下MD培养基配方，搅拌并加热辅助至完全溶解。
RD培养基配方：20 g D-葡萄糖 （60902ES）、13.4g不含氨基酸YNB(60901ES) 、0.4 mg D-生物素（60338ES）
注：可以提前配制500×生物素母液（200 mg/100 mL），每升培养基加0.05 mL母液替代直接称取微量粉末，减少误差。
2. 0.22 μm孔径滤器（84309ES）过滤除菌。
固体培养基配制：
1. 用500 mL无菌去离子水（60168ES）溶解以下MD培养基配方，搅拌并加热辅助至完全溶解。
RD培养基配方：20 g D-葡萄糖 （60902ES）、13.4g不含氨基酸YNB(60901ES) 、0.4 mg D-生物素（60338ES）
2. 0.22 μm孔径滤器（84309ES）过滤除菌并保持70℃
3. 用500 mL无菌去离子水（60168ES）溶解20 g琼脂粉
4. 高压灭菌70℃水浴备用，按照1:1充分混合后倒平板
5. 室温凝固后4℃避光保存
Q1: 为什么MD培养基中使用葡萄糖？
A1: 葡萄糖是酵母容易利用的碳源之一，能够支持酵母较快生长。因此，MD培养基常用于需要观察菌落生长、筛选转化子或进行基础培养的实验场景。相比甲醇培养基，MD更适合支持细胞恢复和生长；相比甘油培养基，MD更偏向基础筛选和葡萄糖条件培养。
Q2: MD和MG/MGY培养基有什么区别？
A2: MD培养基碳源为葡萄糖，用于转化子筛选、基础培养、可快速观察菌落是否生长；MG/MGY培养基为甘油，用于诱导前菌体扩增。
Q3: MD和SD培养基有什么区别？
A3: MD和SD都属于相对基础的酵母培养基，但侧重点不同。MD培养基以葡萄糖为碳源，用于基础培养和筛选，SD培养基通过缺失特定营养成分实现营养缺陷筛选。
Q4: MD 培养基可以和抗生素一起使用吗？
A4:可以根据实验需要添加，但应确认抗生素是否适合对应酵母筛选体系。抗生素一般不建议与培养基一起高温高压灭菌，通常应在培养基冷却后无菌加入。如果是平板筛选，建议在培养基冷却至适宜温度后加入抗生素，混匀后倒板。
|
产品货号 |
产品名称 |
|
Yeast Nitrogen base 酵母氮源基础 |
|
|
D(+)-Glucose,anhydrous D(+)-无水葡萄糖 |
|
|
D-Biotin D-生物素 |
|
|
Agar琼脂粉 |
|
|
Ammoniumsulphate,≥99.0%,AR硫酸铵,≥99.0%,AR |
|
|
SterileDeionizedWater(PCRGrade)无菌去离子水(PCR级) |
|
|
DistilledWater蒸馏水 |
|
|
针头式过滤器，0.22µm，PES，25mm，灭菌 |
|
培养基全称 |
适用菌株/实验场景 |
培养基制备方案 |
|
Synthetic Dropout Medium 合成缺陷培养基（SD） |
酵母单/双杂交实验、基因互补实验，用于单质粒转化验证、共转化验证、蛋白互作功能初筛等 |
|
|
Regeneration Dextrose Medium 再生葡萄糖培养基（RD） |
毕赤酵母原生质体转化实验，用于原生质体复苏再生、转化子选择性培养、阳性转化单克隆分离筛选 |
|
|
Minimal Dextrose Medium 最小葡萄糖基础培养基（MD） |
毕赤酵母表达菌株构建、转化子初筛、表型鉴定、菌株保藏，适配 GS115、X33 等多种常用毕赤酵母菌株 |
|
|
Minimal Glycerol Medium 最小甘油基础培养基（MG/MGY） |
毕赤酵母重组菌株种子液活化与富集、诱导前菌体大量增殖，为后续蛋白诱导表达准备高活性菌体 |
|
|
Minimal Methanol Medium 最小甲醇基础培养基（MM） |
毕赤酵母外源蛋白诱导表达、Mut表型鉴定、缺陷型菌株转化子筛选，适配多种常用毕赤酵母菌株 |
细菌培养相关专题详见官网：
