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养猪业是我国畜牧业的支柱产业，直接关系到民生供给与产业经济稳定。而作为一种急性、烈性、高度接触性传染病，非洲猪瘟的爆发与传播，给全球养猪业带来了毁灭性，其发病率和死亡率可达100%，不仅造成难以估量的经济损失，还严重扰乱了生猪养殖产业链秩序。

由于目前非洲猪瘟尚无有效疫苗和治疗手段，实验室诊断作为防控的核心环节，IVD（体外诊断）技术便成为阻断病毒传播、实现早发现、早处置的关键支撑，其中qPCR液体试剂、冻干试剂及等温扩增技术是当前应用最广泛的三大核心技术路线。

一、非洲猪瘟疾病核心背景

非洲猪瘟病毒（ASFV）是一种大型双链DNA病毒，具有极强的环境抵抗力，在低温、潮湿环境中可存活数月甚至数年，既能通过接触传播、体液传播，也能通过蜱虫等媒介传播，传播途径隐蔽且多样，给防控工作带来极大挑战。感染后的生猪会出现高热、皮肤发绀、呼吸困难、内脏出血等典型症状，发病快、死亡快，一旦在养殖场爆发，往往会导致全群覆灭。

从防控逻辑来看，非洲猪瘟的防控核心在于“早检测、早隔离、早扑杀”，而IVD技术正是实现“早检测”的核心手段——通过快速、准确检测出感染个体（包括潜伏期感染猪）和污染环境，才能从源头切断传播链条，降低疫情扩散风险。因此，选择合适的IVD检测技术与试剂，成为养猪场、屠宰场、动物防疫机构等相关主体的重要课题。

二、核心IVD技术路线原理解析

目前，非洲猪瘟IVD检测的核心技术主要围绕病毒核酸检测展开，其中qPCR（实时荧光定量PCR）液体试剂、qPCR冻干试剂、等温扩增技术凭借各自优势，覆盖了不同场景的检测需求，三者的技术原理各有侧重，适配不同的应用场景。

（一）qPCR液体试剂：实验室精准检测的“金标准”

qPCR（实时荧光定量PCR）技术是OIE推荐、我国首选的非洲猪瘟常规诊断工具，其液体试剂是实验室检测主流。核心原理是基于PCR核酸扩增，在反应体系中加入荧光基团，通过仪器实时监测荧光信号，实现病毒核酸定量检测。该试剂以液体形式封装，含热启动Taq酶、引物等核心组分，检测时提取病毒DNA加入试剂体系，经PCR仪完成“变性-退火-延伸”循环反应，探针与目标片段结合后随扩增累积荧光信号，仪器可精准判断感染情况。常用TaqMan探针法，特异性更高，是非洲猪瘟检测的优选方法。

（二）qPCR冻干试剂：便携场景的“稳定之选”

qPCR冻干试剂是在液体试剂的基础上，通过冷冻干燥技术（冻干技术）将反应体系中的水分去除，制成干燥的粉末或颗粒状试剂，其核心原理与qPCR液体试剂一致，均基于实时荧光定量PCR的核酸扩增与荧光检测逻辑，区别主要在于试剂的形态与稳定性设计。冻干试剂需在低温真空环境下制备，添加冻干保护剂以维持酶、引物等核心组分的生物活性。使用时加缓冲液或样品溶液即可快速复溶，后续检测流程与液体试剂一致，有效解决液体试剂低温储运难题，提升稳定性与便携性。

（三）等温扩增技术：现场快速检测的“便捷工具”

等温扩增技术是一类无需PCR仪的高温变性步骤，在恒定温度（通常为60-65℃）下即可完成核酸扩增的技术，目前在非洲猪瘟现场快速检测中应用广泛，其核心原理是利用特殊的DNA聚合酶（如Bst DNA聚合酶）的链置换活性，在等温条件下实现病毒核酸的快速扩增。以常用的环介导等温扩增技术（LAMP），针对非洲猪瘟病毒VP72基因设计特异性引物，在Bst DNA聚合酶作用下，63℃左右反应55分钟即可完成指数级扩增。扩增产物可通过荧光染色或目视判读（钙黄绿素显色，阳绿阴橘黄），无需复杂仪器，简便高效；改良后加入dUTP/UDG防污染系统，可降低假阳性风险。

三、技术路线核心差异对比

qPCR液体试剂、qPCR冻干试剂、等温扩增技术，三者在技术特性、操作要求、适用场景等方面存在显著差异，明确这些差异是选择合适检测方案的关键，具体对比如下：

（一）技术特性差异

1. 扩增条件：qPCR液体试剂和冻干试剂均需要PCR仪，通过程序控制温度变化（通常为95℃变性、55-60℃退火、72℃延伸），完成扩增循环；等温扩增技术无需PCR仪，只需恒定温度（60-65℃），可通过金属浴等简易设备实现，甚至部分产品可实现室温扩增。
2. 检测灵敏度：qPCR液体试剂和冻干试剂的灵敏度最高，可检测到极低拷贝数的病毒核酸（通常可达10拷贝/μL以下），且能实现定量检测，精准判断感染程度；等温扩增技术的灵敏度略低，通常为100拷贝/μL左右，以定性检测为主，部分改良产品可接近qPCR技术的灵敏度。
3. 特异性：qPCR技术（无论液体还是冻干试剂）通过特异性引物和探针的双重作用，特异性极强，可有效区分非洲猪瘟病毒与其他猪瘟类病毒；等温扩增技术的特异性主要依赖引物设计，若引物设计合理，可达到较高特异性，但整体略低于qPCR技术。
4. 稳定性：qPCR液体试剂对储存和运输条件要求较高，需-20℃冷冻储存、冷链运输，反复冻融易导致酶活性下降；qPCR冻干试剂稳定性极强，可在4℃甚至室温下储存和运输，无需冷链，反复复溶后仍能维持较好的活性；等温扩增试剂稳定性介于两者之间，部分产品可实现室温储存，但长期储存仍需低温。

（二）操作与成本差异

1. 操作难度：qPCR液体试剂和冻干试剂操作相对复杂，需要专业人员、无菌实验室环境，且需完成核酸提取、体系配制、上机检测等多个步骤，耗时较长（通常1.5-2小时）；等温扩增技术操作简便，无需专业实验室，可现场完成核酸提取（甚至部分产品可免提取）和扩增检测，耗时短（通常30-60分钟），非专业人员经简单培训即可操作。
2. 设备成本：qPCR技术需配备实时荧光定量PCR仪，设备成本较高（数万元至数十万元），适合规模化实验室；等温扩增技术无需昂贵设备，仅需简易恒温设备（如金属浴），甚至可目视判读，设备成本极低，适合现场检测和基层防疫。
3. 试剂成本：qPCR液体试剂单份成本适中，适合批量检测；qPCR冻干试剂因冻干工艺复杂，单份成本略高于液体试剂；等温扩增试剂单份成本最低，适合大规模现场筛查。

（三）适用场景差异

1. qPCR液体试剂：适合省级、市级动物疫病预防控制中心、大型养殖企业实验室等，用于常规检测、确诊检测、批量样品筛查，以及感染程度的定量分析，是实验室精准检测的核心选择。
2. qPCR冻干试剂：适合基层防疫机构、偏远地区养殖场、移动检测车等，需要便携、稳定的检测方案，且对检测精度有较高要求的场景，解决了液体试剂冷链运输不便的痛点。
3. 等温扩增技术：适合养殖场入场筛查、屠宰场宰前快速检测、疫情现场应急检测、基层散户检测等，需要快速、便捷、低成本，且无需专业设备和人员的场景，是“早发现”的重要补充手段。

四、非洲猪瘟IVD检测技术应用现状

随着非洲猪瘟防控工作的常态化，我国非洲猪瘟IVD检测技术已形成“精准检测+快速筛查”的多元化应用体系，三大技术路线各司其职、互补应用，覆盖了从实验室确诊到现场筛查的全场景需求，整体应用呈现以下特点：

1. qPCR技术主导实验室精准检测，各级相关机构均配备实时荧光定量PCR仪，qPCR液体试剂作为确诊和批量筛查“金标准”广泛应用，冻干试剂则逐步推广至基层，解决其冷链储运难题，提升基层检测能力。
2. 等温扩增技术成为现场快速筛查主力，凭借快速、便捷、低成本优势，广泛应用于入场检疫、应急检测等场景，改良型产品（如免提取试剂）进一步简化流程、提升检测效率。
3. 技术持续迭代，qPCR试剂稳定性和抗干扰能力提升，等温扩增技术灵敏度优化，可冻干产品和“核酸提取+检测”一体化试剂盒，进一步降低操作门槛、提升便携性，适配基层需求。
4. 检测场景不断延伸，覆盖饲料、环境、运输工具等全环节，形成全链条检测体系；高通量检测技术应用增多，满足规模化批量检测需求。

 

永利3044集团官网非洲猪瘟IVD解决方案及产品推荐

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