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病原UCF解决方案 | 霍乱检测怎么选?荧光定量PCR与tNGS双技术路径及原料解决方案

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2026-07-24

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导语

霍乱弧菌引起的急性水样腹泻可在夏季、洪涝灾害后或饮水食品污染事件中快速暴发。重症患者若未及时补液,可能迅速发生脱水、休克甚至死亡,因此检测既要快,也要能够区分具有公共卫生意义的产毒株与其他弧菌或致泻菌。

霍乱检测怎么选技术?疑似病例快速确认、环境或水体筛查、已知靶标定性以及产毒相关基因联合检测,优先采用荧光定量PCR;当需要同时识别肠道症候群中的多种病原,进一步分析血清群、毒力岛、耐药基因、变异株及暴发传播关系时,可采用病原tNGS。

培养、血清学凝集和药敏试验仍具有重要价值。PCR与tNGS应根据应急检测、常规监测、菌株表型确认和流行病学溯源的不同目的,与传统方法形成互补。

【原料解决方案】针对霍乱弧菌检测,永利3044集团官网提供从粪便、水体、食品及环境样本核酸提取、荧光定量qPCR扩增、病原tNGS多重扩增建库到tNGS RDC定制开发的原料支持,帮助疾控、海关、检测机构和IVD企业构建快速确认、症候群筛查及分子溯源方案。

永利3044集团官网完整解决方案
01
核酸提取复杂肠道与环境样本前处理
02
荧光定量qPCR快速确认与产毒株鉴别
03
病原tNGS毒力、耐药、分型与溯源
Part 1 核酸提取解决方案
样本兼容性好:兼容拭子、全血、血浆、痰液、肺泡灌洗液、脑脊液等多类样本,并可围绕粪便、水体和食品前处理开展适配验证;
操作简便快速:原文单样本提取流程约40 min,可进一步搭配自动化设备建设批量检测流程;
病原适用范围广:化学法与机械法结合,可用于细菌、病毒、支原体和真菌等微生物核酸提取。

粪便和食品样本常含胆盐、多糖、血红素及其他PCR抑制物,水体样本又可能需要富集。建立霍乱检测流程时,应把样本均质、富集或浓缩、裂解效率、抑制物去除和自动化交叉污染控制纳入整体验证。

Part 2 荧光定量qPCR检测解决方案

荧光定量PCR可围绕霍乱弧菌种属靶标、O1/O139相关靶标和产毒相关基因进行单重或多重设计,从而在数小时内完成疑似病例、密切接触者、食品、水体或环境样本的快速筛查。对于阳性结果,应结合靶标组合、流行病学信息及培养或血清学结果进行解释。

01
Hieff Unicon® Universal Superfast qPCR Mix(One Tube)(Cat#16924ES)

通用型全预混、高灵敏并支持快速扩增的多重qPCR预混液,适合突发腹泻疫情的快速筛查和大批量样本处理。

02
Hieff Unicon® Pure Pro U+ qPCR Mix(One Tube)(Cat#16713ES)

通用型高灵敏、防污染多重qPCR预混液,适合关注低残留和扩增产物污染控制的应急检测体系。

03
Hieff Unicon® Lyo-Ready I TaqMan Multiplex qPCR Mix(UDG plus)(Cat#11893ES)

可冻干的快速qPCR预混液,适合现场检测、口岸应用以及需要常温运输和长期储存的产品开发。

快速与高通量:一管式预混体系支持快速程序,适合暴发期间的批量筛查;
低浓度模板检测:优化缓冲体系有助于提高低浓度模板检出能力,原文体系指标可达200 copies/mL,最终LoD需结合样本前处理和靶标设计验证;
防污染与稳定性:部分产品采用dUTP/UDG体系,并支持加速及反复冻融稳定性评估;
多平台适配:可围绕Bio-Rad CFX96、ABI Q5、7500、SLAN及天隆等仪器开展适配验证。
Part 3 霍乱病原tNGS多重扩增与分子溯源

基于多重扩增的靶向tNGS可在肠道症候群Panel中同时覆盖霍乱弧菌及其他致泻病原,并围绕毒力相关区域、血清群标志、耐药基因和分型位点获取更丰富的序列信息。对于暴发调查,可进一步用于比较病例、食品、水体或环境样本中的序列特征,为传播链分析提供分子证据。

tNGS输出的是Panel覆盖范围内的序列信息,其分辨率取决于靶标设计、扩增均一性、测序深度和生信分析策略。若任务是高分辨率菌株亲缘关系或全基因组溯源,应根据目标分辨率评估更广覆盖的长片段Panel或全基因组方案。

01
长片段多重PCR扩增预混液

4× Hieff® Multiplex PCR Master Mix 2.0多重PCR预混液(Cat#12977):支持2000 bp以内不同片段长度的多重扩增,适用于毒力、分型、耐药或较长基因区域覆盖;优化体系有助于提高低浓度模板灵敏度,并具有较好的加速及冻融稳定性。

02
低背景菌超多重PCR扩增预混液(1–2000重Panel)

4× Hieff® Multiplex PCR Master Mix 多重PCR预混液(Cat#12948):支持1–2000重Panel扩增,适合肠道症候群、多毒力位点和耐药位点并行检测;低背景生产与严格质控有助于降低病原tNGS原料背景干扰。

对需要立即处置的疑似霍乱病例,qPCR更适合快速确认;tNGS更适合在快速检测之后开展多病原并行、毒力耐药分析和暴发溯源,不能替代培养、血清学分型及表型药敏的全部作用。
Part 4 病原tNGS产品定制化服务(tNGS RDC)

tNGS RDC(Research Development Center)可根据企业客户需求提供霍乱或肠道症候群Panel设计、靶标筛选、引物池开发、扩增均一性优化、原料筛选、返样验证和产品定型支持。

客户项目创意
项目论证
研发设计
产品小样
小试、中试
产品定型
产品供应
稳定供货
定制项目类型
肠道症候群tNGS Panel:基于多重PCR技术覆盖霍乱弧菌及其他细菌、病毒或寄生虫靶标,交付Panel与扩增试剂;
霍乱弧菌毒力、耐药和分型Panel:围绕毒力岛、血清群、耐药基因及分型位点设计靶向扩增方案;
长片段或更高分辨率方案:根据暴发溯源目标开发长片段Panel,并兼容二代或三代测序平台;
试剂优化:针对粪便、水体等复杂样本的抑制、低浓度模板和扩增均一性开展返样优化。
定制项目支持实力
IVD研发中心(IVD RDC)
  • 定制化IVD原料开发
  • 分子诊断体系开发经验
  • 高频交互与快速响应
超洁净分子酶工厂
  • 转产放大与规模化生产
  • ISO 13485质量体系管理
  • 产能、品质及成本控制
分子酶筛选与研发平台
  • 高通量酶筛选与测试
  • 发酵、纯化和分子酶研发
  • 定制项目候选原酶支持
永利3044集团官网技术研究院
  • 产学研联动
  • 新酶发现与酶进化
  • 定向改造与原料资源积累
霍乱检测方案如何选择?

疑似病例、环境或食品样本快速筛查:优先采用核酸提取+多重qPCR,联合种属、血清群和产毒相关靶标。

突发腹泻症候群的多病原并行检测:采用超多重PCR Panel+tNGS,减少逐项排查时间。

毒力、耐药或变异株分析:采用靶向tNGS,并结合培养菌株和表型试验进行解释。

暴发传播链和跨区域溯源:根据所需分辨率选择长片段Panel或更广覆盖的基因组分析方案。

常见问题
检测到霍乱弧菌是否就等于确诊产毒性霍乱?

不能只依赖单一种属靶标。应结合产毒相关基因、血清群、培养或血清学结果及流行病学信息综合判断。

霍乱检测用qPCR还是tNGS?

快速确认和应急筛查优先使用qPCR;多病原并行、毒力耐药分析、变异株研究和溯源可使用tNGS。

tNGS能否替代培养和药敏试验?

不能完全替代。tNGS提供基因型耐药信息,而培养、血清学与表型药敏仍是确认菌株特征和药物敏感性的关键方法。

结语

霍乱检测需要兼顾应急处置速度和后续流行病学分辨率。荧光定量PCR适合霍乱弧菌、血清群和产毒相关靶标的快速检测;病原tNGS适合肠道多病原并行、毒力耐药分析、变异株识别及暴发溯源。永利3044集团官网提供从复杂样本核酸提取、qPCR扩增到tNGS多重扩增建库和RDC定制开发的原料支持。

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产品类型 产品功能 产品名称 货号
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核酸提取仪 96通道自动化核酸提取仪 80510ES
qPCR Mix 四代快速、低残留、全预混 Hieff Unicon® Universal Superfast qPCR Mix(One Tube) 16924ES
三代全预混、低残留 Hieff Unicon® Pure Pro U+ qPCR Mix(One Tube) 16713ES
三代通用全预混 Hieff Unicon® Universal TaqMan Pro U+ qPCR Mix(One Tube) 16710ES
二代全预混(5×浓度) Hieff Unicon® Universal TaqMan Multiplex qPCR Master Mix(UDG plus) 13891ES
一代全预混 Hieff Unicon® TaqMan Multiplex qPCR Master Mix (UDG plus) 13171ES
耐抑制性强 Hieff Unicon® Universal TaqMan multiplex qPCR master mix 11211ES/11212ES
高灵敏、可冻干 Hieff Unicon® Lyo-Ready I TaqMan Multiplex qPCR Mix (UDG plus) 11893ES
tNGS及配套产品推荐
产品类型 产品功能 产品名称 货号
核酸提取 提取试剂盒 MolPure® Magnetic Pathogen DNA/RNA Kit 磁珠法病原DNA/RNA提取试剂盒 18306ES
核酸提取仪 96通道自动化核酸提取仪 80510ES
一步法逆转录试剂盒 一步法逆转录多重扩增 Hieff® Multiplex RT-PCR Kit 多重RT-PCR试剂盒 12950ES
长片段一步法逆转录多重扩增 Hieff® AccuLong Onestep Multiplex RT-PCR Kit 13315ES
多重扩增试剂 长片段多重扩增 4× Hieff® Multiplex PCR Master Mix 2.0 4×多重PCR预混液 12977ES
超多重扩增 4× Hieff® Multiplex PCR Master Mix 4×多重PCR预混液 12948ES
逆转录试剂 预混版逆转录 Hieff NGS® 1st cDNA Synthesis Mix 一链cDNA合成预混液 12958ES
基础版逆转录 Hieff NGS® 1st cDNA Synthesis Mix 一链cDNA合成预混液 12946ES
核酸清除剂 气溶胶核酸清除 Non-Corrosive Nucleic Acid Remover 无腐蚀核酸清除试剂 19710ES
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