病原UCF解决方案 | 狂犬病检测，快检还是溯源？RT-qPCR与tNGS双技术路径
10
2026-07-24
狂犬病是由狂犬病病毒及其他狂犬病相关病毒引起的人兽共患中枢神经系统感染，主要通过患病动物咬伤或抓伤传播。一旦出现临床症状，疾病几乎均可致死，因此实验室检测的价值不仅在于病例确认，也包括动物源头监测、暴露风险研判和传播来源调查。
狂犬病检测应该选RT-qPCR还是tNGS？对疑似人或动物样本进行快速、定向检测，或开展犬类等宿主动物带毒筛查时，实时RT-qPCR流程更短、结果更直接，是常规检测的重要技术路径；当常规检测结果与流行病学信息不一致，或需要鉴别其他狂犬病相关病毒、分析病毒基因型、变异特征、宿主来源及传播关系时，可采用靶向tNGS获得序列信息。
tNGS不应替代暴露后处置决策，也不宜替代所有常规确证方法。更合理的分工是：RT-qPCR承担快速检测，tNGS承担疑难鉴别、分型和公共卫生溯源，并结合抗原检测、样本类型和流行病学资料综合解释。
【原料解决方案】针对狂犬病病毒RNA检测，永利3044集团官网提供从病毒核酸提取、一步法RT-qPCR扩增，到tNGS逆转录多重扩增建库及RDC定制开发的原料支持，服务于疾控、动物疫控、海关、检测机构及IVD企业的快检、分型和溯源方案。
狂犬病病毒为RNA病毒，样本类型和采样时机对结果影响显著。方案验证应覆盖组织匀浆、唾液或拭子等不同基质，并关注RNA降解、样本不均一、宿主核酸背景、抑制物去除和冷链运输。用于生前检测时，单一样本或单一时间点的阴性结果尤其需要谨慎解释。
实时RT-qPCR可围绕狂犬病病毒相对保守区域设计单重或多重检测体系，在同一反应中完成逆转录和荧光定量扩增，适合人或动物疑似样本快速检测、宿主动物监测和明确靶标的产品开发。若方案需兼顾遗传差异较大的狂犬病相关病毒，应通过序列比对、引物探针覆盖分析和代表性样本验证降低变异导致的漏检风险。
通用型全预混、高灵敏并支持快速扩增的多重RT-qPCR预混液，适合强调检测时效和批量通量的狂犬病病毒检测方案。
通用型高灵敏、耐抑制并支持快速扩增的多重RT-qPCR预混液，适合复杂样本基质和多靶标联合体系开发。
可冻干的快速RT-qPCR预混体系，适合需要常温运输、长期储存或现场应用形态的产品开发。
不同宿主和地区流行的狂犬病病毒存在遗传差异，蝙蝠等动物还可能携带其他狂犬病相关病毒。靶向tNGS可覆盖核蛋白、糖蛋白等关键基因，或通过长片段方案覆盖更大范围的病毒基因组，辅助鉴别相关病毒并分析基因型、变异、宿主来源和传播关系。
tNGS更适用于输入性病例、来源不明病例、跨宿主传播调查、动物疫情监测和疑难样本补充鉴别。其分辨率取决于Panel覆盖范围、扩增均一性、测序深度和生信数据库；若任务要求全基因组层面的高分辨率传播分析，应评估长片段或全基因组测序方案。
Hieff® Multiplex RT-PCR Kit（Cat# 12950ES）将逆转录与首轮多重扩增衔接，减少操作步骤和开盖污染风险，适合RNA病毒靶标Panel及直接测序流程开发。
4× Hieff® Multiplex PCR Master Mix 2.0（Cat# 12977ES）支持2000 bp以内不同片段长度的多重扩增，适合狂犬病病毒关键基因、连续变异区域和更大范围基因组覆盖。
4× Hieff® Multiplex PCR Master Mix（Cat# 12948ES）支持高重数Panel，可用于并行覆盖狂犬病病毒、其他相关病毒及分型位点，并关注低背景与扩增均一性。
tNGS RDC（Research Development Center）可根据企业客户的狂犬病检测产品规划，提供靶标筛选、Panel设计、引物池开发、扩增均一性优化、原料筛选、返样验证和产品定型支持。
- 定制化IVD原料开发
- 分子诊断体系开发经验
- 高频交互与快速响应
- 转产放大与规模化生产
- ISO 13485质量体系管理
- 产能、品质及成本控制
- 高通量酶筛选与测试
- 发酵、纯化和分子酶研发
- 定制项目候选原酶支持
- 产学研联动
- 新酶发现与酶进化
- 定向改造与原料资源积累
疑似人或动物样本快速检测：优先采用病毒RNA提取＋一步法RT-qPCR，重点验证样本类型、低拷贝检出和内标监控。
宿主动物批量监测：采用自动化核酸提取＋RT-qPCR，重点关注通量、交叉污染、批间稳定性和多平台适配。
疑难鉴别与相关病毒识别：采用RNA多重扩增Panel＋tNGS，扩大病毒种类及序列覆盖范围。
病毒分型、来源和传播关系研究：根据所需分辨率选择关键基因Panel、长片段方案或更广覆盖的全基因组方案。
明确靶标的快速检测和批量监测优先使用RT-qPCR；疑难鉴别、相关病毒识别、分型和溯源可使用tNGS。
不能脱离样本类型、采样时间、核酸质量和检测体系性能解释。尤其是生前检测，应结合多种样本、临床表现及其他实验室方法综合判断。
不能。暴露后处置强调及时性，应依据专业规范立即评估和处理，不能等待tNGS或其他实验室结果后再决定。
狂犬病检测既要争取快，也要在必要时看得更深。一步法RT-qPCR适合狂犬病病毒的快速、定向检测和宿主动物批量监测；病原tNGS适合疑难样本鉴别、其他狂犬病相关病毒识别、基因分型、变异分析和公共卫生溯源。以RT-qPCR承担前线检测，以tNGS补充序列证据，再与抗原检测、样本信息和流行病学调查综合解释，可形成更清晰的分层技术路径。永利3044集团官网提供从病毒核酸提取、RT-qPCR扩增，到tNGS多重扩增建库和RDC定制开发的原料支持。
| 产品类型 | 产品功能 | 产品名称 | 货号 |
|---|---|---|---|
| 核酸提取 | 提取试剂盒 | MolPure® Magnetic Pathogen DNA/RNA Kit 磁珠法病原DNA/RNA提取试剂盒 | 18306ES |
| MolPure® Magnetic Universal Viral DNA/RNA Kit 磁珠法通用病毒DNA/RNA提取试剂盒 | 18521ES | ||
| 核酸提取仪 | 96通道自动化核酸提取仪 | 80510ES | |
| RT-qPCR Mix | 三代快速、高灵敏、耐抑制 | Hifair® Universal Advanced Multiplex One Step RT-qPCR Mix (UDG Plus) | 16930ES |
| 二代通用、高灵敏 | Hifair® C203P1 Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit（UDG Plus） | 16630ES | |
| 一代通用 | Hifair® V C58P2 Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus) | 13650ES | |
| 高浓度一管式（5X浓度） | Hifair® Advanced One Step RT-qPCR Probe Mix（UDG Plus） | 16921ES | |
| 二代全预混、快速 | Hifair® Superpro Fast One Step RT-qPCR Master Mix（UDG Plus） | 16913ES | |
| 一代全预混 | Hifair® Superpro Ⅱ One Step RT-qPCR Master Mix | 11899ES | |
| 通用快速可冻干 | Hifair® Lyo-Ready I Multiplex One Step RT-qPCR Kit（UDG plus) | 16645ES |
| 产品类型 | 产品功能 | 产品名称 | 货号 |
|---|---|---|---|
| 核酸提取 | 提取试剂盒 | MolPure® Magnetic Pathogen DNA/RNA Kit 磁珠法病原 DNA/RNA 提取试剂盒 | 18306ES |
| 核酸提取仪 | 96 通道自动化核酸提取仪 | 80510ES | |
| 一步法逆转录试剂盒 | 一步法逆转录多重扩增 | Hieff® Multiplex RT-PCR Kit 多重 RT-PCR 试剂盒 | 12950ES |
| 长片段一步法逆转录多重扩增 | Hieff® AccuLong Onestep Multiplex RT-PCR Kit | 13315ES | |
| 多重扩增试剂 | 长片段多重扩增 | 4× Hieff® Multiplex PCR Master Mix 2.0 4× 多重 PCR 预混液 | 12977ES |
| 超多重扩增 | 4× Hieff® Multiplex PCR Master Mix 4× 多重 PCR 预混液 | 12948ES | |
| 逆转录试剂 | 预混版逆转录 | Hieff NGS® 1st cDNA Synthesis Mix 一链 cDNA 合成预混液 | 12958ES |
| 基础版 | Hieff NGS® 1st cDNA Synthesis Mix 一链 cDNA 合成预混液 | 12946ES | |
| 核酸清除剂 | 气溶胶核酸清除 | Non-Corrosive Nucleic Acid Remover 无腐蚀核酸清除试剂 | 19710ES |
