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本试剂盒检测原理如下：在SDH催化琥珀酸脱氢的过程中，辅基FAD接受氢原子被还原为FADH，此反应通过与外源性电子受体2,6-二氯酚靛酚（2,6-DPIP）的还原过程偶联，2,6-DPIP被还原后颜色由蓝色变为无色。通过分光光度法监测2,6-DPIP在600 nm波长处的吸光度下降速率，即可间接计算出SDH的酶活性。

本产品检测灵敏度高，线性范围宽，样品用量少，适用于检测动物血清/浆、动物组织、细胞、植物组织等的琥珀酸脱氢酶(SDH)活力。

产品信息

组分信息

备注：

工作液的配制：按试剂一:试剂二:试剂三:试剂四:试剂五:试剂六 = 2:0.1:0.1:0.2:0.1:0.1的比例进行配制，用多少配多少，现用现配，注意配好后一定要避光。

建议60426ES-E试剂五放于-25～-15℃避光保存。

使用说明

1.仪器试剂准备

含600 nm波长的分光光度计、1 cm 光径比色皿、37℃水浴锅、台式低速离心机、各种规格移液器、双蒸水、生理盐水（0.9%）或PBS（0.1M）、涡旋混匀器、离心管、蛋白测定试剂。

2.样本前处理

1）血清/血浆

取不抗凝或抗凝全血1000～1500转/分，离心8分钟，取上层血清/浆待测。

2）组织标本

准确称取待测组织的重量，按重量（g）：体积(mL)=1:9 的比例，加入生理盐水，冰水浴条件下机械匀浆，2500转/分钟，离心10分钟，取上清液待测（上清液需要测定其蛋白浓度）。

3.操作步骤

1）将可见分光光度计于600 nm处，1 cm光径比色皿，以双蒸水调零。比色皿需准备两个，一个用于调零，一个用于测定。

2）将工作液37℃避光预温5分钟以上。

3）往相应编号的试管中加入100 μL待测样本，用5 mL移液器吸取2.6 mL工作液迅速冲入试管中，立即混匀并计时。

4）迅速倒入比色皿中在可见分光光度计600 nm处比色，10秒时读取吸光度值（A1值），在1分10秒时再次测定吸光度值（A2值）。

5）求出2次吸光度差值（△A=A1-A2）。

4.计算公式

1）组织中琥珀酸脱氢酶活力的计算：

定义：每毫克蛋白每分钟使反应体系的吸光度降低0.01为1个比活性单位。

计算公式： SDH活力（U/mgprot）= ΔA ÷ 0.01 ÷ T ÷ (V样 × Cpr)

其中，T：表示反应时间，1分钟；V样：表示组织匀浆加入量，0.1 mL；Cpr：表示待测样本蛋白浓度，mgprot/mL（prot 指蛋白）。

2）血清中琥珀酸脱氢酶活力的计算：

定义：每毫升血清每分钟使反应体系的吸光度降低0.01为1个比活性单位。

计算公式： SDH活力（U/mL）= ΔA ÷ 0.01 ÷ T ÷ V样

其中，T：表示反应时间，1分钟；V样：表示血清加入量，0.1 mL。

2～8℃避光保存，有效期3个月。