上新 | 核酸内切酶V (Endonuclease V)：助力核酸损伤与编辑研究
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2026-06-16
腺嘌呤（A）脱氨基生成次黄嘌呤（I），是生物体内最为常见的核酸损伤类型，广泛发生于 DNA 复制、转录及细胞应激过程中，直接影响核酸结构稳定与基因组完整性。在 DNA 中，脱氧腺苷（dA）脱氨形成脱氧次黄嘌呤（dI），易与胞嘧啶（dC）错误配对，若未及时修复，会引发 A-T→G-C 的稳定突变，显著提高基因突变与疾病发生风险；在 RNA 中，A脱氨生成I，作为 A-to-I RNA 编辑的核心标记，参与基因表达与蛋白功能调控，并与肿瘤、神经系统疾病密切相关。由于传统修复酶对 dI/I 位点识别特异性低、切割效率差，难以精准区分正常碱基与损伤碱基，长期制约着核酸损伤修复机制的研究与精准检测技术的发展。
针对这一痛点，永利3044集团官网特推出 Endonuclease V (Cat#14274ES)。该酶源自大肠杆菌，又称脱氧次黄嘌呤核苷 3´ 内切酶，可识别 DNA 中的 dI，并切割 dI 的 3´ 端第二个磷酸二酯键，产生 3´ 羟基与 5´ 磷酸的标准切刻末端。它可高效识别含脱氧次黄嘌呤核苷（无论配对与否）的双链及单链 DNA，同时对含脱碱基（AP）位点、尿素、碱基错配、插入 / 缺失错配、发夹结构、未配对 loop 环、折叠 flap 及类 Y 型结构的 DNA 均具备识别能力。
图1. Endonuclease V工作原理示意图
基于上述特性，Endonuclease V 可广泛应用于以下应用场景：
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修饰核酸富集：高效富集低丰度肌苷修饰 RNA/DNA，提升低丰度编辑样本的检测灵敏度；
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核酸损伤研究：专一切割 dI/I 脱氨损伤，用于DNA/RNA 修复机制研究；
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基因编辑研究：精准识别并切割 A-to-I 编辑产物，用于编辑位点鉴定与定量分析。
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高效切割含 dI 的DNA，与同类进口品牌A*表现相当
图2. 永利3044集团官网Endonuclease V切割活性验证
注：在20 μL 体系中加入 50 pmol 含 dI 单链 DNA，与指定酶量 37℃孵育 15 min，65℃ 20 min 灭活，采用TBE‑尿素变性聚丙烯酰胺凝胶（TBE-Urea PAGE）检测。
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核酸外切酶和RNase残留低
图3. 永利3044集团官网Endonuclease V核酸外切酶和RNase残留检测结果
注：经琼脂糖凝胶电泳检测，三批次Endonuclease V与核酸底物共同孵育后，电泳条带清晰、单一，未见降解或拖尾现象。
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产品名称 |
产品货号 |
特性 |
典型应用 |
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Endonuclease V |
识别 DNA 中的dI，并切割dI的3´端第二个磷酸二酯键 |
RNA 编辑研究、修饰核酸富集、核酸损伤研究 |
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DNase I |
Mg²⁺/Mn²⁺存在下随机切割DNA |
RNA提取过程中的基因组DNA去除、反转录前的基因组DNA清除、体外转录后模板DNA的消化、RNA建库过程中rRNA去除、缺口平移法进行DNA标记、DNase I足迹法分析实验 |
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Thermolabile dsDNase |
特异性切割双链DNA为小片段 |
反转录前的基因组DNA清除 |
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Micrococcal Nuclease |
降解单链、双链、线状、环状等多种形式的DNA或RNA |
染色质免疫沉淀实验 |
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UltraNuclease |
广谱核酸酶，可在链内任意核苷酸间进行切割，将核酸完全消化成2-5个碱基长度的5'-单磷酸寡核苷酸 |
在病毒纯化、疫苗生产、蛋白和多糖类制药工业作为宿主残留核酸去除试剂、科学研究中降低细胞上清和细胞裂解液的粘度 |
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T7 Endonuclease I |
切割错配/十字形DNA，作用错配碱基5'端 |
基因编辑效率检测 |
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Endonuclease VIII |
兼具糖基化酶和AP裂解酶活性 |
NGS建库修复、含U片段克隆 |
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T4 Endonuclease V |
特异性切割嘧啶二聚体DNA |
紫外线损伤修复、光复活研究 |
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Endonuclease IV |
切割氧化损伤/ AP位点DNA |
细胞DNA氧化损伤修复、单细胞凝胶电泳（彗星实验）、碱洗脱、碱解旋 |
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RNase A |
特异性降解单链RNA的C和U残基 |
制备质粒和基因组DNA、从重组蛋白制剂中去除RNA、核糖核酸酶保护试验 |
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RNase H |
特异性地水解DNA/RNA杂交链上的RNA的磷酸二酯键 |
rRNA去除、cDNA二链合成前去除mRNA、Oligo(dT)与mRNA杂交之后去除poly(A)、RNA特异位点的剪切 |
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RNase HII |
识别DNA-rN-DNA/DNA双链，在单核糖核苷酸残基处从5’端进行切割 |
LAMP高灵敏度探针法检测、RNaseHII依赖性PCR(rhPCR)、切除聚合酶聚合过程中错配形成的核糖核苷酸、冈崎片段RNA部分的降解 |
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限制性核酸内切酶 |
识别并切割双链DNA分子中特定核苷酸序列 |
分子克隆、DNA甲基化分析、DNA图谱分析与鉴定、mRNA质粒模板线性化、DNA文库构建等 |
*参考文献：
[1] Lazzarotto C R, Katta V, Li Y, et al. Sensitive and unbiased genome-wide profiling of base-editor-induced off-target activity using CHANGE-seq-BE[J]. Nature Biotechnology, 2026: 1-11.
[2] Wei S C, Cantor A J, Walleshauser J, et al. Evaluation of subretinally delivered Cas9 ribonucleoproteins in murine and porcine animal models highlights key considerations for therapeutic translation of genetic medicines[J]. Plos one, 2025, 20(6): e0317387.
[3] Mitchell L, Saville L, Haight T, et al. Differential adenosine to inosine RNA editing of SINE B2 non-coding RNAs in mouse unveils a novel type of epi-transcriptome response to amyloid beta neuro-toxicity[J]. bioRxiv, 2026: 2026.01. 30.702824.
