推荐应用
核糖核酸酶A(Ribonuclease A,RNase A),一种含4个二硫键的单链多肽,分子量约为13.7 kDa。作为一种核糖核酸内切酶(endoribonuclease),特异性降解单链RNA上的胞嘧啶(C)或尿嘧啶(U)残基。具体来说,切割识别的是由某核苷酸上的5’-核糖和相邻的嘧啶类核苷酸3’-核糖上磷酸基团形成的磷酸二酯键,从而使得2’, 3’-环磷酸水解为对应的3’-核苷磷酸(比如,pG-pG-pC-pA-pG经RNase A切割产生pG-pG-pCp 和A-PG)。
RNase A切割单链RNA活性最高,且在多种反应条件下均有活性:在低盐浓度(0-100 mM NaCl)下,可用来切割单链RNA、双链RNA以及RNA-DNA杂交形成的RNA链,然而高盐浓度(≥0.3 M)下,RNase A仅特异性切割单链RNA。
核糖核酸酶A(RNase A)最常见的应用在于质粒DNA或基因组DNA制备过程中去除RNA,因此制备过程中DNase酶活性的存在与否是需要重视的污染之一,可采用水浴煮沸这种传统方法来灭活DNase活性。另外,本品还可用于RNA酶保护分析、RNA序列分析等分子生物学实验。
酶活单位定义:在25°C和pH 5.0条件下,使RNA以k(速度常数)等于单位(Kunitz units)的速率水解的酶的数量。
本品以溶液形式提供,浓度为100 mg/mL。推荐工作浓度为1-100 μg/mL,因应用类型的不同而异。
特异性降解单链RNA上的胞嘧啶(C)或尿嘧啶(U)残基。
切割单链RNA活性最高,且在多种反应条件下均有活性。
冰袋运输。产品-20℃保存,有效期2年。保存缓冲液为50 mM Tris-HCl (pH 7.4)和50% (v/v)甘油。
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