推荐应用
RNase HII是来源于深渊热球菌 (Pyrococcus abyssi, P.a.),经E.coli大肠杆菌重组表达获得的核糖核酸内切酶。它识别DNA-rN-DNA/DNA双链,在DNA掺入核糖核苷酸的位点进行切割,但对单链RNA切割活性极低,对dsDNA、ssDNA无切割活性。RNase HII在单核糖核苷酸残基处从 5’端进行切割,切割后产生一个 5′ 端磷酸基团和一个 3′ 端羟基。该RNase HII酶在70~75°C具有最佳活性,在50°C~75°C间均具有活性,但是室温下活性极低。本品极度耐热,95°C孵育45 min后,几乎没有活性损失,可与PCR各反应体系兼容。
应用场景:
- LAMP高灵敏度探针法检测;
- RNaseHII依赖性PCR(rhPCR);
- 切除聚合酶聚合过程中错配形成的核糖核苷酸;
- 冈崎片段RNA部分的降解。
- 在70~75°C具有最佳活性,在50°C~75°C间均具有活性;
- RNase HⅡ极度耐热,95°C反应30 min后,仍保持活性,可于rhPCR各反应体系兼容,也适用于LAMP等;
- 无核酸外切酶、切口酶、RNase残留,低宿主残留(<0.5 copies/U)。
- E. coli基因组DNA残留< 0.5 copies/100 U
对不同批次的RNase HII (Cat#14539ES)进行E. coli基因组DNA残留检测,结果显示永利3044集团官网RNase HII宿主基因组DNA残留远低于0.5 copies/100 U。

图1. E. coli基因组DNA残留检测
- 95℃耐热性测试
对RNase HII (Cat#14539ES)进行95℃加热0~45 min后,测试RNase HII的酶活结果,结果表明永利3044集团官网RNase HII加热45 min后,酶活几乎没有损失。

图2. 95℃耐热测试结果
- 无核酸外切酶、切口酶、RNase残留
将1 U 不同批次的RNase HII分别与相应的底物DNA/RNA在37℃孵育4 h,琼脂糖凝胶电泳检测结果表明,RNase HII无核酸外切酶、切口酶、RNase残留。

图3. 核酸外切酶、切口酶、RNase残留检测结果
-25~-15℃保存,有效期2年。
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