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动植物组织RNA稳定液-RNA防降解好帮手

5751

2026-03-12

“样本离体那一刻,RNA的倒计时就开始了。”

                                            ——每一位分子生物学实验员的痛,我们都懂。 

一、背景介绍:为什么RNA如此“娇贵”?

RNA(核糖核酸)是基因表达的关键媒介,在转录组测序、qPCR、Northern blot等下游应用中不可或缺。然而,RNA分子极其不稳定,极易被广泛存在于环境、试剂甚至操作者皮肤上的RNase(核糖核酸酶)降解。

尤其在动植物组织采样过程中,从组织离体到加入裂解液之间往往存在时间差。在这段时间内,内源性RNase会被迅速激活,导致RNA快速降解,严重影响后续实验结果的准确性和可重复性。

传统做法是将样本立即投入液氮速冻,再转移至-80℃保存。但这种方式对野外采样、大规模取样或无液氮条件的实验室极不友好。

有没有一种方法,能在常温下稳定RNA,让采样更自由、运输更便捷、保存更安心?

答案就是——RNA稳定液。

图1 有无稳定液保存的操作流程对比

二、技术应用:RNA稳定液如何守护你的样本?

RNA稳定液是一种专为保护组织样本中RNA完整性而设计的试剂。其核心作用机制包括:

  1. 快速渗透组织:在数分钟内渗入细胞,抑制内源性RNase活性;
  2. 常温稳定RNA:无需液氮或超低温冰箱,室温下可稳定保存数天至数周;
  3. 兼容多种下游应用:适用于qPCR、RNA-seq、芯片分析等多种分子实验;
  4. 适用广泛样本类型:涵盖动物组织(肝、脑、肌肉等)、植物组织(叶片、根、果实等)乃至微生物样本。

 

典型应用场景:

  1. 野外动植物采样(无液氮条件)
  2. 多中心临床样本收集与运输
  3. 高通量筛选项目中的批量样本处理
  4. 教学实验或资源有限实验室的常规RNA提取

图2 RNA稳定液适用样本与应用领域

三、常见实验步骤(实验方案)

以下以永利3044集团官网(Yeasen)RNA稳定液为例,介绍标准操作流程:

实验前准备:

  • RNA稳定液(预冷至4℃效果更佳)
  • 无菌镊子、剪刀
  • 无RNase的离心管(1.5 mL或2 mL)
  • 待采集的动植物组织样本

操作步骤:

1、样本采集

迅速剪取目标组织(建议单份样本≤100 mg),避免反复冻融或长时间暴露于空气中。

2、立即浸入稳定液

将组织完全浸没于5–10倍体积的RNA稳定液中(如100 mg组织加入1 mL稳定液)。

3、孵育渗透

动物组织:室温孵育4–24小时(推荐过夜)。

植物组织:因细胞壁较厚,建议4℃孵育24小时,或真空抽吸辅助渗透。

4、长期保存或转运

短期(≤7天):可置于4℃保存

长期(数月):转移至-20℃或-80℃冷冻保存

运输:常温或冰袋即可,无需干冰

5、后续RNA提取

取出组织,用PBS轻柔冲洗表面残留稳定液,按常规TRIzol法或柱式法进行RNA提取。

  • 提示:经稳定液处理的样本,RIN值(RNA完整性数值)通常可达8.0以上,满足高通量测序要求。

四、总结:让RNA不再“稍纵即逝”

RNA稳定液的出现,彻底改变了传统RNA样本处理的局限。它不仅降低了实验门槛,提升了样本质量的一致性,更为科研工作者赢得了宝贵的时间与空间自由度。

无论是深入雨林采集珍稀植物,还是在医院病房收集临床活检样本,一瓶小小的RNA稳定液,都能成为你手中最可靠的“RNA守护者”。

选择一款高效、稳定、兼容性强的RNA稳定液,就是为你的整个转录组研究打下坚实的第一块基石。

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