高特异性Lambda核酸外切酶(λ Exonuclease)，单链DNA制备优选方案
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2026-02-06
在分子生物学实验中，单链DNA的制备效率与纯度，直接影响测序、扩增、构象分析等后续实验的准确性。Lambda核酸外切酶（λ Exonuclease）作为特异性极强的5´→3´核酸外切酶，正是解决这一核心需求的关键工具酶。
它能精准识别并选择性消化5´端磷酸化的双链DNA，沿5´→3´方向逐步降解目标链，而对单链DNA、5´端未磷酸化的DNA降解速度极慢。通过这种特异性降解特性，可高效保留互补链，轻松实现高纯度单链DNA的制备，为多场景科研实验提供稳定底物。
凭借高度特异性的底物识别能力与高效降解特性，λ Exonuclease的应用场景广泛覆盖分子生物学核心研究，包括：生成单链PCR产物用于DNA测序、DNA单链构象多态性(SSCP)分析、滚环扩增实验、双链DNA片段单链化、PCR产物克隆、质粒纯化等，是科研工作者的“多面手”工具酶。
永利3044集团官网全新推出 Lambda Exonuclease（Cat#14527ES），具备高纯度、强活性、低残留、低内毒素等卓越性能，可有效替代进口产品，为科研工作者提供更可靠的实验解决方案。
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高纯度保障：蛋白纯度≥95%，减少杂蛋白对实验的干扰，确保酶促反应的稳定性。
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强活性表现：酶活对标进口品牌，在相同反应条件下可实现高效底物降解，提升实验效率。
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低残留控制：切口酶、RNase 酶残留极低，避免非特异性酶切及核酸污染，保障实验结果的可靠性。
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低内毒素水平：内毒素含量＜10EU/mg，适用于细胞相关实验等敏感场景。
在20 µL反应体系中加入 5 pmol 27 bp 5´-磷酸化修饰双链 DNA 片段，与进口品牌Supplier A*产品分别进行酶切反应。结果显示，永利3044集团官网产品与进口产品对目标底物的降解效果一致，均能高效完成特异性降解。
相同反应体系中加入5 pmol 27 nt 5´-磷酸化修饰单链DNA片段，实验结果表明，永利3044集团官网产品对单链DNA 的降解效率显著低于对5´-磷酸化双链DNA的降解效率，且与进口品牌Supplier A*产品表现类似，体现出良好的底物特异性。
图3. 永利3044集团官网与进口品牌对5´磷酸化修饰的ssDNA消化的效果比较
在20 µL反应体系中加入5 pmol 23 bp无5´-磷酸化修饰双链DNA片段，酶切结果显示，永利3044集团官网产品对该底物基本无降解效果，与进口品牌Supplier A*性能相当，进一步验证了其底物特异性。
图4. 永利3044集团官网与进口品牌对无5´磷酸化修饰的dsDNA消化效果比较
分别将50 U和5 U λ Exonuclease与核酸底物一起孵育，琼脂糖凝胶电泳比较谱带变化，结果显示产品的切口酶、RNase 酶残留均处于极低水平。内毒素含量严格控制在 10EU/mg 以下，符合细胞相关实验等敏感场景要求。
图5. 永利3044集团官网 λ Exonucleas 切口酶、RNase酶、内毒素残留检测结果
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产品名称 |
产品货号 |
特性 |
典型应用 |
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Lambda exonuclease |
5'→3'高效降解双链DNA释放单核苷酸，底物需要是5'磷酸化的双链DNA |
单链DNA制备、质粒变性DNA降解 |
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Exonuclease I |
3'→5'水解单链DNA，不作用双链DNA/RNA |
PCR引物去除、单链DNA纯化 |
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Exonuclease III |
作用于双链DNA，从3'-OH末端方向逐步切去单核苷酸 |
非定向巢式缺失、定点突变、链特异性探针制备、ssDNA制备 |
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T5 Exonuclease |
5'→3'降解DNA，不作用超螺旋双链 |
无缝克隆、质粒变性DNA降解、消化未环化的线性模板 |
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T7 Exonuclease |
5'→3'降解双链DNA或RNA/DNA杂交双链，释放单核苷酸 |
无缝克隆、单链DNA制备、消化未环化的线性模板、质粒变性DNA降解 |
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RNase R |
3'→5'核糖核酸外切酶，能消化所有的线性RNA，不易消化呈环形的RNA、套索结构或3’端突出末端少于7个核苷酸的双链RNA |
富集环状RNA |
