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UniPhi29 DNA Polymerase来源于 Bacillus subtilis 噬菌体,是通过对野生型 phi29 DNA 聚合酶进行基因工程改造获得的突变体。与野生型 phi29 DNA 聚合酶相比,该酶可在 42°C 条件下持续进行 DNA 合成,这一高温反应特性显著提升了实验表现。
1) 提升复杂模板的扩增能力:增强了对高 GC 含量、回文结构等复杂模板的延伸能力,使 NGS 测序覆盖度更加均一,降低所需测序深度,同时减少测序中的 Gap 区域,提高单细胞测序的数据质量与完整度。
2) 提高扩增产物产量与效率:在全基因组扩增(WGA)、多重置换扩增(MDA)及滚环扩增(RCA)等实验中,高温反应条件(42℃)显著提高了扩增产物产量及扩增效率。
3) 降低非特异性扩增:高温反应条件(42℃)有效减少了非特异性扩增产物的生成,提升了反应特异性。此外,UniPhi29 DNA Polymerase 保留了强效的 3'→5' 外切酶校读活性,合成 DNA 片段的保真性高。由于该酶的外切酶活性较强,在合成过程中,引物需进行 3' 末端硫代修饰,以降低外切活性对引物的切割效应。
-25~-15℃保存,有效期2年。
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