gDNA 片段化参考说明书酶切条件酶切 20 min，竟然切不动？
gDNA 片段化参考说明书酶切条件酶切 20 min，竟然切不动？
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2026-10-10
一般优先考虑 DNA 的质量问题，比如 Input DNA 中引入高浓度金属离子螯合剂或其他盐离子，可能会影响酶切效果，建议将 DNA 稀释在 ddH2O 或不含 EDTA 的10 mM Tris Buffer (pH 7.5-8.0)中再进行片段化。其次，如果样本是反转录得到的全长 cDNA，则需考虑样本纯度问题。另外，对于环状DNA 的酶切，需要另行摸索酶切时间体系。特殊样本可考虑磁珠纯化之后进行酶切或适当延长酶切时间。
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