MDA产物能否直接用于NGS文库构建？需要哪些预处理步骤？
MDA产物能否直接用于NGS文库构建？需要哪些预处理步骤？
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2026-09-17
不可直接建库，必须完整预处理，三步缺一不可：
- 热灭活终止反应：65℃孵育 10 min，彻底消除 UniPhi29 残留酶活，避免降解文库片段；
- 磁珠纯化去除杂质：0.6–0.9× 磁珠两轮纯化，清除残留随机引物、dNTP、游离酶蛋白；
- 片段化处理：超声或酶切打断高分子量分支 DNA 至 200–500 bp 文库区间，保证接头连接效率。
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