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新品│Endonuclease VIII：精准切割DNA受损碱基，助力基因损伤修复研究

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2023-08-25

核酸内切酶 Ⅷ(Endonuclease VIII, Endo Ⅷ)是一种具有N-糖基化酶活性(N-glycosylase)和AP-裂解酶(AP-lyase)活性的DNA损伤修复酶，参与氧化产生的DNA损伤的碱基切除修复。

作用原理

Endonuclease VIII识别双链DNA上受损碱基并在其N-糖基化酶活性作用下切除双链DNA上受损的嘧啶碱基，产生一个脱嘌呤(AP)位点。随后，在其AP裂解酶活性作用下切割AP位点的3'和5'端，产生一个具有3'和5'磷酸的碱基缺口。

图1. Endonuclease VIII反应原理示意图

永利3044集团官网Endonuclease Ⅷ

永利3044集团官网的Endonuclease Ⅷ（Cat#14536ES）由分子酶改造平台——ZymeEditor™重组表达而来，高纯度，无核酸外切酶、核酸内切酶以及RNase残留。可应用于单细胞凝胶电泳、NGS建库中DNA损伤修复、酶法合成DNA中释放DNA链、碱洗脱，搭配UDG(Cat#10303ES)进行含U片段的克隆等。

数据展示

受损碱基切除效果与进口品牌一致

分别使用永利3044集团官网与进口品牌N*的Endonuclease Ⅷ催化20 pmol寡聚核苷酸，20 µL反应体系中加入5~40 U的Endonuclease Ⅷ 和相同酶活的UDG(Cat#10303ES)，37℃孵育1 h。琼脂糖凝胶电泳检测结果表明，永利3044集团官网Endonuclease Ⅷ与进口品牌N*的碱基切除效果一致。

图2. 受损碱基切除效果对比

无核酸外切酶、核酸内切酶、RNase残留

将10 U Endonuclease VIII分别与相应的底物DNA/RNA在37℃孵育4 h，琼脂糖凝胶电泳检测结果表明，Endonuclease VIII 无核酸外切酶、核酸内切酶、RNase残留。

图3. 核酸外切酶、核酸内切酶、RNase残留检测结果

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定位		产品名称	产品货号
	识别并切除受损碱基	Endonuclease VIII (10 U/μL)	14536ES
含U片段的克隆	与Endo Ⅷ搭配使用	Uracil DNA Glycosylase(UDG/UNG),heat-labile(1 U/μL)	10303ES
	耐U高保真酶	Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase (3 U/μL)	14384ES
	核酸电泳	Agarose琼脂糖	10208ES
		YeaRed Nucleic Acid Gel Stain(10,000× in Water)	10202ES
		Gold Band系列marker	10501ES-10518ES
转化与鉴定	抗生素	羧苄，卡那，潮霉素B等	/
转化与鉴定	感受态细胞	TOP10 、DH5α ，BL21等	11801ES-11803ES