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永利3044集团官网琼脂糖——直击电泳痛点，跑出一手好胶

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2022-10-25

直击电泳痛点，跑出一手好胶

琼脂糖（Agarose）是纯化的线性半乳聚糖亲水胶体，提取自琼脂或者含琼脂的海藻，结构上是一种线性聚合物，由β-D-吡喃半乳糖（1-4）连接3,6-脱水α-L-吡喃半乳糖基构成。作为一种凝胶试剂，常用于通过凝胶电泳或者印迹法（如Northern或Southern）来进行日常核酸分析，也适用于蛋白应用，如辐射状免疫扩散（RID）实验。

琼脂糖凝胶电泳是用琼脂糖作支持介质的一种电泳方法，包括制胶、点样、电泳，分析原理与其他支持物电泳最主要区别是它兼有“分子筛”和“电泳”的双重作用。将凝胶置于电场中，带电荷的核酸通过凝胶网孔向正极迁移。在不同条件下电泳适当时间后，大小、构象不同的核酸片段将处在凝胶不同位置上，从而达到分离的目的。

图1.核酸电泳实验操作步骤

图2.电泳迁移方向图

如何选购合适的琼脂糖？

1、根据琼脂糖的基本参数进行判断

1）硫酸盐含量（sulfate content）——纯度指标；
2）凝胶强度（gel strength）——施加于凝胶使之断裂的外力；
3）胶凝点（Gel point）——水溶性琼脂糖溶液冷却后形成凝胶时的温度；
4）电内渗（EEO）——液体穿透凝胶的一种电动运动。琼脂糖凝胶内的阴离子基团吸附在基质上不会发生迁移，但是解离的阳离子就会朝负极迁移，从而产生电渗。由于样本的电泳迁移通常是朝正极移动，因此EEO产生的内部对流会干扰分离效率。

根据琼脂糖的基本参数，优质的琼脂糖凝胶应该胶孔清晰、胶体不易断，具备纯度高（硫酸盐含量低）、凝胶强度大、胶凝点相对高（常温条件下凝固快）、电内渗低等特点。

2、根据琼脂糖的分离范围进行判断

琼脂糖凝胶的分离范围较广，常用于DNA切胶回收、DNA分离和用于佐证DNA是否重组、质粒等是否切开。不同大小的目的片段也对应着不同大小的琼脂糖浓度，根据高浓度适合分离小片段原则，可参考下表找到合适自己的最佳胶浓度。

琼脂糖浓度 %	≥3	2-3	1-2	0.7-1	≤0.7
分子大小 bp	≤200	200-700	700-1500	1500-5000	≥5000

永利3044集团官网高质量琼脂糖

覆盖多种应用场景，满足您的需求

产品名称	产品货号	产品规格	应用场景
Agarose琼脂糖	10208ES60/76	100 g/500 g	常规核酸电泳
Low Melting Point Agarose 低熔点琼脂糖	10214ES25/60	25 g/100 g	适用于大于1 kb核酸分离、细胞培养和病毒空斑实验等
3:1 Agarose 3:1琼脂糖	10220ES25/60	25 g/100 g	小片段DNA（1 kb以下）具有很高的分辨率，可配高达5%的凝胶
High Sieving Agarose 高分辨率琼脂糖(PCR级)	10221ES08/25	5 g/25 g	适宜分离20 bp-800 bp的DNA片段，效果与聚丙烯酰胺相当
Agarose Tablets 琼脂糖(片剂,0.5 g/片)	10226ES70	1盒（200片）	应用常规琼脂糖，无需称量更方便

产品优势

电渗值低（EEO≤0.13)，条带分离效果好，分得开；跑得快

图2.不同浓度凝胶电泳图

注：0.75%琼脂糖凝胶上样：1kb ladder，1%琼脂糖凝胶上样：100 bp ladder、1kb ladder、2000 DNA Marker、5000 DNA Marker，2%琼脂糖凝胶上样：100 bp ladder、2000 DNA Marker、5000 DNA Marker；上样量：Marker 原液 2 μl 稀释 5 倍后上样 10 μl；0.75%、1%、2％琼脂糖凝胶电泳程序分别为： 115V，45min； 130V，40 min； 130V，50 min。

胶孔清晰直挺，凝胶强度大，不易断裂

注.图示为永利3044集团官网琼脂糖10208ES60产品展示图。

高质量琼脂糖使用方法

琼脂糖凝胶浓度通常在0.7%至2%之间选择。浓度越高，凝胶的分子孔径越小，DNA迁移速率越慢，分辨率越高。反之，浓度越低，DNA迁移速率越快，分辨率较低。针对实验目的不同，选择合适的凝胶浓度与适配的电泳缓冲液。

琼脂糖浓度	有效分离范围（bp）	推荐缓冲液
0.5%	2,000-50,000	1×TAE
0.8%	800-10,000	1×TAE
1.0%	400-8,000	1×TAE
1.2%	300-7,000	1×TAE
1.5%	200-3,000	1×TAE/0.5×TBE
2.0%	100-2,000	1×TAE/0.5×TBE
3.0%	25-1,000	0.5×TBE

TAE缓冲液：TAE缓冲液含有乙酸（Acetic acid）、EDTA和Tris，适合用于快速电泳和大片段DNA的分离。乙酸的存在降低了凝胶的pH值，有助于提高电泳速度。

TBE缓冲液：TBE缓冲液含有硼酸（Boric acid）、EDTA和Tris，其离子强度较高，适合用于小片段DNA的高分辨率分离。硼酸根离子的存在增强了凝胶的稳定性，有助于提高分离效率。因此凝胶浓度大时，需采用TEB缓冲液，便于分离条带。

琼脂糖片剂（10226ES）使用方法

按0.5g/片剂将适量琼脂糖片剂（10226ES）在缓冲液中浸泡2-3 min使之完全崩解，之后按照常规琼脂糖配制方法操作即可。请参考下表：

凝胶浓度%	1片（0.5g/片剂）	2片（0.5g/片剂）	3片（0.5g/片剂）
1%	50 mL	100 mL	150 mL
2%	25 mL	50 mL	75 mL

已发表文献（部分）

[1] Wang M, Zhang S, Zheng G, et al. Gain-of-function mutation of Card14 leads to spontaneous psoriasis-like skin inflammation through enhanced keratinocyte response to IL-17A[J]. Immunity, 2018, 49(1): 66-79. e5.(IF=26.3)

[2] Zhu M, Dai X. Systematic modulation of bacterial resource allocation by perturbing RNA polymerase availability via synthetic transcriptional switches[J]. Nucleic Acids Research, 2025, 53(15): gkaf814.(IF=13.1)

[3] Lei Z, Qiang L, Ge P, et al. Rab14 restricts pathogens by promoting V-ATPase lysosomal delivery to drive lysosomal acidification[J]. Nature Communications, 2026.(IF=15.7)

[4] Chen Q, Kou H, Demy D L, et al. The different roles of V-ATPase a subunits in phagocytosis/endocytosis and autophagy[J]. Autophagy, 2024, 20(10): 2297-2313.(IF=14.3)

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相关产品选择指南

产品定位	产品名称	产品货号	产品规格	应用场景
核酸染料	Goldview Nucleic Acid Gel Stain (10,000×)	10201ES03	1 mL	特别适合大于1kb的片段检测
	YeaRed Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in Water)	10202ES76	500 μL	水溶，与EB具有相同的光谱特性，300 nm处紫外光激发检测
	YeaRed Nucleic Acid Gel Stain(10,000× in DMSO)	10203ES76	500 μL	DMSO溶液，300 nm处紫外光激发检测
	YeaGreen Nucleic Acid Gel Stain (10,000×in Water)	10204ES76	500 μL	适用于使用471 nm激发的紫外凝胶成像透射仪或可见光凝胶透射仪
琼脂糖电泳 DNA Marker	GoldBand DL2000 DNA Marker	10501ES60/80	100 T/10×100 T	100-2000 bp
	GoldBand DL600 DNA Marker	10502ES60/80	100 T/10×100 T	100-600 bp
	GoldBand DL5000 DNA Marker	10504ES60/80	100 T/10×100 T	100-5000 bp
	GoldBand DL10,000 DNA Marker	10505ES60/80	100 T/10×100 T	100-10,000 bp
	GoldBand 100bp DNA Ladder	10507ES60/80	100 T/10×100 T	100-1,500 bp
	GoldBand 1 kb DNA Ladder	10510ES60/80	100 T/10×100 T	250-12,000 bp
	GoldBand Full-Scale DNA Ladder	10511ES80	1 mL	100-12,000 bp
	GoldBand DL15000 DNA Marker	10512ES60/80	100 T/10×100 T	250-15,000 bp
	GoldBand 50 bp DNA Ladder	10515ES60/80	100 T/10×100 T	50-1000 bp
	GoldBand 100 bp plus DNA Ladder	10516ES60/80	100 T/10×100 T	100-3000 bp
	GoldBand 200 bp DNA Ladder	10517ES60/80	100 T/10×100 T	200-5000 bp
	GoldBand 500 bp DNA Ladder	10518ES60/80	100 T/10×100 T	500-5000 bp