巨噬细胞极化细胞因子套装上新：BMDM定向诱导M1/M2
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2026-06-11
小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDM)是一种通过体外诱导分化获得的原代巨噬细胞模型。它是从小鼠的股骨和胫骨中提取骨髓细胞，在特定细胞因子的诱导下，经过约7天的培养，使骨髓中的造血祖细胞增殖、分化为成熟的、具有功能的巨噬细胞。由于其易于获取、可大量扩增、遗传背景一致（可使用基因修饰小鼠）以及能模拟体内巨噬细胞的关键特性，BMDM已成为免疫学、炎症性疾病、感染免疫和肿瘤学等领域中最重要、最常用的原代细胞模型之一。
M1型和M2型是巨噬细胞在特定微环境信号诱导下发生的两种主要极化（功能分化）状态。M1型巨噬细胞的核心功能是促炎、抗肿瘤、杀伤病原体，介导Th1型免疫应答。M2型的核心功能是抗炎、组织修复、促进肿瘤进展。参与Th2型免疫应答，抑制过度炎症。
原代骨髓巨噬实验最头疼的问题： 因子配比不确定、批次差异大、分化率忽高忽低、M1/M2极化表型混乱、重复无数次仍出不了稳定数据。为解决广大免疫科研用户的实验痛点，小鼠BMDM专用细胞因子诱导套装正式上新！ 标准化文献配比，一套集齐分化+M1促炎极化+M2抗炎极化，全程无需自己摸索配方，轻松做出可重复、可发文的巨噬模型。
1. BMDM成熟分化系统 M-CSF：诱导小鼠骨髓单核细胞定向分化为成熟、高纯度静息巨噬细胞，7天稳定成型。
2. M1型促炎极化系统（经典活化）： IFN-γ + LPS， 定向诱导M1巨噬，高表达促炎因子，用于急性炎症、抗感染、抗肿瘤免疫研究。
3. M2型抗炎修复极化系统（替代活化）： IL-4 + IL-13 ，高效诱导M2巨噬，主打炎症抑制、组织修复、纤维化、肿瘤微环境方向研究。
图1.M1和M2型巨噬细胞的区别[1]
1. 告别配比摸索，直接上手实验：完全参考高分文献标准终浓度预配，无需自行计算、分装、配比，大幅节省实验摸索周期。
2. 低内毒素、高活性、本底干净：重组蛋白活性稳定，无杂污染，避免巨噬细胞自发性激活，数据更可信、更适合发文。
3. 批次差异极小，重复性拉满：解决自配试剂批次不稳定、结果忽高忽低、实验难以重复的常见痛点。
4. 全套实验SOP免费附赠：骨髓提取→分化培养→极化加药时序→分组设置→标志物检测方案，新手也能一次成功。
5. M1 / M2 明确分型，表型干净不混杂
M1 促炎巨噬
标志物：Nos2、TNF-α、IL-1β、IL-6、CD86
功能：急性炎症、抗菌抗病毒、抗肿瘤免疫激活
M2 修复巨噬
标志物：Arg1、Ym1、CD206、IL-10
功能：组织修复、抗炎、器官纤维化、肿瘤免疫逃逸
小鼠骨髓中富含造血源性悬浮干/祖细胞，M‑CSF结合髓系前体细胞表面CSF‑1R并激活其下游信号通路，促使骨髓髓系前体细胞定向增殖分化、逐步获得贴壁生长特性，分化为静息态M0型小鼠骨髓来源巨噬细胞（BMDM），该细胞具备巨噬细胞固有形态、表型与生物学功能。后续可通过不同细胞因子微环境调控极化方向：LPS（脂多糖）联合IFN‑γ可激活NF‑κB炎性信号通路，诱导M0型BMDM向促炎的M1型巨噬细胞极化，高表达促炎因子与CD86等标志物；IL‑4联合IL‑13可激活JAK‑STAT6信号通路，诱导M0型BMDM向抗炎修复的M2型巨噬细胞极化，高表达抗炎因子与CD206等标志物。
图2.巨噬细胞诱导分化实验原理
1.小鼠骨髓细胞提取
1.1.小鼠(6~8周)颈椎脱臼法处死，将处死的小鼠迅速放入含有75%酒精的小烧杯中浸泡2min。
注：BMDM受污染后，培养时会变得不粘附，因此暴露骨髓前应确保乙醇彻底浸泡小鼠
1.2.在超净台中，手术取出所有的胫骨和股骨，并用剪刀和镊子将骨周围的肌肉组织尽量去除干净；
注：BMDM接种培养后汇合度能达到75%，如果细胞较稀少，可能是由于切割股骨和胫骨边缘过多导致收集的骨髓量不足，每次应切割骨边缘0.5毫米，以减少损失。
1.3.将取好的骨头转移到装有无菌PBS的培养皿中，涮洗一次后转移至另一个装有无菌PBS（41403ES）的培养皿；
1.4.用剪刀剪去骨的两端，再用注射器抽取PBS，针头分别插入两端骨髓腔中，用注射器打入PBS，反复冲洗骨髓至培养皿中，直至骨头完全变白；
注：分离过程应全程在冰上操作，保持低温环境。
1.5.收集骨髓悬液，用70 μm筛网（84702ES）过滤去除小碎片和肌肉组织；将滤过液500g，5 min离心，弃去上清；
1.6.将离心后的沉淀吹散，用ACK缓冲液去除红细胞，200g、5min离心，弃去上清。
1.7.将细胞以5×105个cells/mL接种在含有10%FBS（40132ES）、1%青霉素-链霉素（60162ES）和10ng/mL M-CSF（91114ES）的DMEM培养基（41401ES）中进行培养。
2. 巨噬细胞极化诱导
2.1隔天半量换液，给细胞补充新鲜的含细胞因子M-CSF的培养基。诱导分化6-7天，细胞分化成M0。
注：大概3天后，骨髓细胞培养物开始呈现良好状态，形成了分裂细胞簇，此时已经可以观察到最初的贴壁细胞
2.2.M1方向极化
分化6-7天后，在Mouse M-CSF存在的情况下，继续加入100ng/ml的LPS和50ng/ml的Mouse IFN-γ，极化24-48小时。
2.3 M2方向极化
分化6-7天后，在Mouse M-CSF存在的情况下，继续加入40ng/ml的Mouse IL-4和（或）40ng/ml的Mouse IL-13，极化24-48小时。
3.巨噬细胞鉴定
1.M0型：流式检测，选择F4/80+（32252ES）和CD11b+（32206ES）双阳表达作为鉴定巨噬细胞成熟的标志蛋白；
2.M1型：流式检测，M1巨噬细胞上调表达CD86（771559ES）、MHCⅡ（771591ES）、CD11c（771537ES）等；
3.M2型：流式检测，M2巨噬细胞上调表达CD206（32223ES）等。
4. 实验案例数据
图3.M1/M2 极化流式细胞术散点图
（数据来源于温州医科大学附属第二医院）
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产品分类 |
产品货号 |
产品名称 |
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细胞因子类 |
Mouse Macrophage BMDM Cytokine Set 小鼠骨髓来源巨噬细胞（BMDM)诱导分化细胞因子套装 |
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细胞培养类 |
DMEM High Glucose Medium DMEM 高糖培养基（含L-谷氨酰胺，丙酮酸钠110 mg/L；不含HEPES，双抗） |
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1× PBS 细胞培养级 |
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Fetal Bovine Serum Gold Pro 胎牛血清（特级） |
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Penicillin-Streptomycin (100×), Suitable for Cell culture 细胞培养用青霉素-链霉素（双抗） |
*参考文献
1.Ernestina A , Marcarious M T , Rui Z , et al.Exploring the polarization of M1 and M2 macrophages in the context of skin diseases.Mol Biol Rep. 2024 Feb 1;51(1):269.
