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Laminin-511:诱导多能干细胞培养的功能性基质分子

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2026-04-14

一、概述

Laminin-511(LN-511)是基底膜核心成分之一,由α5、β1和γ1三条链组成,在胚胎发育早期及成人多种组织的基底膜中广泛分布。作为层粘连蛋白家族的重要成员,LN-511凭借其独特的细胞结合特性和多能干细胞支持能力,已成为无饲养层细胞培养体系的关键基质分子,特别是在诱导多能干细胞(iPSC)和胚胎干细胞(ESC)的培养中发挥不可替代的作用。

与传统饲养层培养相比,LN-511具有显著优势:完全重组人源表达,无动物源成分;批次一致性高,实验可重复性强;支持长期稳定培养,维持细胞多能性;与多种培养基兼容,应用灵活。目前,LN-511及其截短形式Laminin-511 E8已成为干细胞培养、类器官构建和再生医学研究的标准化工具,推动了细胞治疗产品的临床转化进程。

二、Laminin-511结构及功能特征

LN-511呈典型十字形结构,包含长臂(三链卷曲螺旋)和三条短臂(球状末端)。其关键功能域包括:

功能域

位置

功能特征

LG1-3球状结构域

α5链C端

结合整合素α6β1和α3β1,介导细胞黏附

肝素结合域

γ1链

结合硫酸乙酰肝素蛋白聚糖,稳定基质

自聚合域

各链N端

形成网络结构,构建三维微环境

LN-511通过整合素受体激活FAK-PI3K-Akt和Ras-MAPK信号通路,维持干细胞自我更新,抑制凋亡和分化。其截短形式Laminin-511 E8保留完整细胞结合能力,分子更小,渗透性更佳。

三、Laminin-511的应用

多能干细胞维持培养LN-511支持iPSC/ESC长期扩增(>10代),保持典型克隆形态、正常核型及多向分化潜能。与E-cadherin联合使用可实现单细胞传代,克隆形成率提高2-3倍。

干细胞定向分化:作为心肌、神经、肝等组织基底膜的天然成分,LN-511为组织特异性分化提供仿生微环境,协同生长因子引导谱系定向。

类器官培养LN-511与FN、胶原等复合,构建脑、肠道、肝等类器官的基质支架,支持细胞自组织和功能成熟。

四、Laminin-511使用方法

包被浓度5-15 μg/mL(常用10 μg/mL),Laminin-511 E8可用6-8 μg/mL。

包被流程

1) 储存液(-80°C)冰上解冻,避免反复冻融;

2) PBS(含Ca²⁺/Mg²⁺)稀释至工作浓度;

3) 加入培养板,37°C 2小时或4°C过夜;

4) 直接使用或4°C保存(1周内)。

细胞接种:密度1-2×10⁵ cells/cm²;单细胞传代时添加Y-27632(10 μM,24小时)提高存活。

培养基兼容:与Essential 8、mTeSR、StemFlex等完全定义培养基优化配伍。

五、参考文献

1. Rodin S, et al. (2010). Long-term self-renewal of human pluripotent stem cells on human recombinant laminin-511. Nature Biotechnology, 28(6):611-615.

2. Miyazaki T, et al. (2012). Recombinant human laminin isoforms can support the undifferentiated growth of human embryonic stem cells. Biochemical and Biophysical Research Communications, 375(1):27-32.

3. Takahashi K, et al. (2007). Induction of pluripotent stem cells from adult human fibroblasts by defined factors. Cell, 131(5):861-872.

4. Lancaster MA, Knoblich JA. (2014). Organogenesis in a dish: modeling development and disease using organoid technologies. Science, 345(6194):1247125.

六、相关产品

产品名称

货号

规格

Recombinant Human Laminin-511 E8 Protein

重组人层粘连蛋白-511LN511 E8)

92634ES

100μg/1mg

Recombinant Human Laminin-521 Protein

重组人层粘连蛋白-521 (LN521)

92602ES

10μg/100μg/1mg

Recombinant Human Fibronectin Protein

重组人纤维连接蛋白 (FN)

92619ES

1mg/5mg/10mg

Recombinant Human Vitronectin Protein, His tag

重组人玻连蛋白(VTN)

92549ES

10μg/100μg/500μg

 

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