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一、亲子鉴定的背景

亲子鉴定，又称亲权鉴定，是通过对人类遗传标记的检测，根据遗传规律分析被检者之间的血缘关系。这项技术不仅应用于传统的亲子关系确认，更是法医个体识别领域的核心工具，广泛应用于失踪人员调查、灾难受害者身份识别、刑事案件中嫌疑人与现场物证的匹配等场景。

传统的鉴定技术主要围绕短串联重复序列（STR）展开。STR因其高度多态性，被誉为法医DNA分析的“金标准”。然而，随着司法实践的发展，检材常面临微量、降解、混合等复杂情况，传统STR技术依赖较长DNA片段的局限性日益凸显。单核苷酸多态性（SNP）因其片段短、基因组分布广、突变率低等优势，成为破解这些难题的关键方向。近年来，二代测序（NGS）技术的崛起，使得同时检测数百个SNP（甚至联合STR）成为可能，为亲子鉴定和个体识别提供了前所未有的高通量、高灵敏度解决方案。

二、亲子鉴定技术方案

目前亲子鉴定及法医个体识别的核心技术主要分为传统检测技术与NGS新一代测序技术，其中传统技术以STR毛细管电泳法、SNP一代测序法为代表，NGS技术则包含多重扩增子NGS法与杂交捕获NGS法，不同技术在检测原理、性能特点、适用场景上差异显著。

技术方案	核心原理	检测标记	优势	局限性	适用场景
STR 毛细管电泳法	荧光标记复合扩增 + 毛细管电泳，检测 STR 重复序列数	STR	操作简单、检测速度快、成本较低；行业金标准，结果认可度高	单反应检测位点少，需多次反应；对降解 / 微量样本检测效果差；无法区分混合样本中不同来源的 STR 序列	常规民事亲子鉴定；新鲜、完整的法医检材个体识别
SNP 一代测序法（Sanger）	直接测序检测单核苷酸位点的碱基差异	SNP	检测结果准确；SNP 片段短，对轻度降解样本有一定耐受性	检测通量低，多位点检测成本高、周期长；突变频率检出灵敏度低（<15% 易假阴性）；消耗检材多	少量 SNP 位点验证；特定场景下的亲缘辅助判定
NGS - 多重扩增子法	多重 PCR 扩增目标 STR/SNP 位点，结合二代测序实现高通量检测	STR、SNP、mtDNA	单反应检测数百个位点，通量高；可精准检测序列信息，区分混合样本；对痕量样本友好（最低可检测 100pg gDNA）；支持血片直扩	相比毛细管电泳法操作稍复杂；需配套生信分析流程	复杂法医检材（微量、轻度降解）的亲子鉴定与个体识别；大规模样本的批量检测
NGS - 杂交捕获法	探针杂交捕获目标 SNP 位点，结合二代测序进行深度分析	SNP	超高灵敏度（0.1ng DNA 即可稳定分型）；对重度降解样本耐受性极强；针对特定人群优化，分辨率高	检测成本相对较高；实验流程稍长	法医疑难检材（重度降解、微量接触 DNA）；针对汉族等特定人群的精准亲子鉴定与个体识别

三、多重扩增子建库在亲子鉴定方面的技术流程

多重扩增子测序（Multiplex Amplicon Sequencing）是目前法医NGS领域应用最广泛的技术路线，其通过设计多重PCR引物 panel，一次性扩增数百至数千个目标位点（SNP、STR或微单倍型），结合二代测序平台进行高通量测序分析。

1. 样本前处理与 DNA 提取

从各类生物检材（如血液、唾液拭子、指甲、毛根、精斑等）中提取微量基因组DNA。保证 DNA 的回收率与完整性。

2. 多重 PCR 扩增目标位点

根据亲子鉴定与个体识别的需求，设计覆盖常染色体 STR/SNP、性染色体 STR/SNP、mtDNA 的特异性多重引物，进行一轮多重 PCR 反应，同时扩增数百个目标基因位点。针对高度片段化的降解样本，将扩增产物长度控制在 80~160bp；对于 DNA 完整度较高的样本，扩增产物长度可设为 160~300bp，兼顾检测效率与位点覆盖度。

3. 文库构建与纯化

• 第一轮磁珠纯化：多重 PCR 扩增完成后，采用磁珠对扩增产物进行纯化，去除未反应的引物、dNTP 及杂蛋白等杂质，获得纯的扩增子产物；
• 接头 PCR 反应：在纯化后的扩增子两侧引入二代测序的通用接头序列（如 Illumina 的 P5/P7 接头），同时加入样本特异性 Barcode，实现多个样本的混合测序；
• 第二轮磁珠纯化：对接头 PCR 产物再次进行磁珠纯化，去除接头二聚体等非特异性产物，得到高质量的测序文库。

4. 文库质检与上机测序

对构建好的文库进行浓度定量与片段大小检测，确保文库质量符合测序要求；将合格的文库按比例混合，加载至二代测序平台进行高通量测序，根据检测需求设置测序深度，保证位点分型的准确性。

5. 生信分析与结果判定

测序完成后，通过生物信息学分析流程对原始测序数据进行处理：包括数据过滤、比对到参考基因组、基因分型（STR 重复数统计、SNP 碱基判定、mtDNA 序列分析）；结合人群遗传频率数据库，计算亲子指数（CPI）、累积排除概率（CPE）或个体识别能力（TDP），最终出具亲子鉴定或个体识别的结果报告。

四、永利3044集团官网相关产品推荐

永利3044集团官网（Yeasen）聚焦于分子生物学检测领域的试剂研发与生产，针对亲子鉴定与法医个体识别的 NGS 多重扩增技术路线，打造了全流程的产品解决方案，覆盖DNA 提取、多重 PCR 扩增、文库构建、磁珠纯化等关键环节，产品兼具高灵敏度、高特异性、高稳定性的特点，适配法医常见检材与主流测序平台。

产品类别	产品名称	货号	规格
核酸提取	MolPure® Magnetic Circulating Cell-FreeDNA Kit 血浆、血清游离 DNA 提取试剂盒	18382ES	20T
	MolPure® Magnetic Spots DNA Kit磁珠法干血斑DNA提取试剂盒	18554ES	48T
	MolPure® Magnetic M4P1 Blood DNA Kit磁珠法血液DNA提取试剂盒	18504ES	50T/200T
	MolPure® Mag96 M4P2 Blood DNA Kit磁珠法96孔血液DNA提取试剂盒（预装版）	18505ES	96T
	MolPure® Mag96 Blood DNA Kit FR 磁珠法96孔血液DNA提取试剂盒FR（预封装）	18362ES	96T
多重扩增试剂	4×Hieff® Multiplex PCR Master Mix	12948ES	24T/48T/96T/1000T
	4×Hieff® Multiplex PCR Master Mix(UDG plus)	12947ES	24T/96T/1000T
定量试剂	ssDNA Assay Kit 单链DNA qubit定量试剂盒	12645ES	100T/500T
	1× dsDNA HS Assay Kit 即用型dsDNA qubit定量试剂	12642ES	100T/500T
纯化磁珠	Hieff NGS® DNA selection Beads (Superior Ampure XP alternative)DNA纯化分选磁珠	12601ES	1mL/5mL/60mL/450mL
接头引物	Hieff NGS® Stubby UDI Primer Kit for Illumina®Set1/Set2/Set3/Set4（板式）	12327-12330ES	96×1T/96×2T
	Hieff NGS® Stubby UDI Primer Kit for Illumina®Set1/Set2/Set3/Set4（板式）	13350-13353ES	96×1T/96×2T
环化试剂	Hieff NGS® Fast-Pace DNA Cyclization Kit	13339ES	16T/96T