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Tris-HCI缓冲液系列产品选购指南

18827

2026-02-28

 

缓冲液是维持生物体系pH稳定的核心试剂,在分子生物学、细胞生物学及生物化学实验中承担着维持蛋白质结构完整性、保障酶活性和稳定核酸分子的关键作用。其中,Tris-HCl(三羟甲基氨基甲烷盐酸盐)缓冲液因其优异的缓冲能力、低毒性、高水溶性及与多种生物分子的良好相容性,已成为实验室最通用、最核心的缓冲体系之一。

 

一、基本信息

  

中文全称:三(羟甲基)氨基甲烷盐酸盐

英文全称:Tris (hydroxymethyl) aminomethane hydrochloride

英文缩写:Tris-HCl

分子式:C4H12NO3·HCl

CAS号:1185-53-1

作用原理:Tris-HCl缓冲液由Tris与HCl形成Tris/Tris-H+共轭酸碱对,依靠氨基的可逆质子化与去质子化实现pH稳定。体系加酸时,游离Tris结合过量H⁺;加碱时,质子化的Tris-H⁺释放H⁺,可有效维持中性至弱碱性生化实验体系的pH稳定。

 

二、特点

  

1.缓冲能力强:在pH 7.0-9.0范围内具有较强的缓冲能力。

2.理化性质优:极易溶于水,配制简单,化学惰性,不与钙、镁及重金属离子发生沉淀。

3.生物兼容性好:对多数酶、蛋白、核酸等作用温和,适合大多数生物化学实验过程。

4.温度敏感:温度每降低1℃,pH大约升高0.03。

  

Tris-HCl缓冲液与PBS缓冲液对比

 

Tris-HCl缓冲液

PBS缓冲液

缓冲体系

Tris+HCl

Na₂HPO₄+KH₂PO₄+NaCl+KCl

pH范围

7.0–9.0(常用7.5–8.8)

固定7.2–7.4(生理pH)

pKa(25℃)

≈8.1

≈7.2

温度敏感性

敏感(ΔpKa/℃≈-0.03)

相对稳定

金属兼容性

惰性强

可按需补充金属离子维持体系活性

易沉淀

易形成磷酸盐沉淀或降低游离金属活度

常见干扰

伯氨基可能与NHS酯、活化基团反应

磷酸根抑制部分磷酸酶、干扰磷酸化研究

优先选择的应用场景

蛋白电泳、蛋白纯化、核酸实验、酶活测定及需精确控制pH 7.5–8.5的生化反应

细胞培养、组织/切片冲洗、免疫组化/荧光、原位杂交、需模拟生理渗透压的体外实验和对磷酸根无干扰的常规缓冲场景

 

 

三、应用场景

  

生物化学实验

1.核酸/蛋白电泳:作为TAE、TBE电泳缓冲液核心组分,广泛用于DNA、RNA、蛋白电泳。

2.蛋白免疫检测:用于Western blot转膜、洗涤及抗体孵育全流程,同时适配ELISA等其他免疫检测实验的反应与洗涤环节。

3.样品制备:细胞裂解、核酸/蛋白提取、蛋白纯化与层析等样品前处理环节,维持生物大分子的结构与活性稳定。

4.酶促反应:为限制性内切酶酶切、PCR扩增、体外转录、蛋白修饰等各类生化反应,提供稳定的中性-弱碱性pH环境,保障酶活性与反应效率。

 

生物医药

1.生产应用:可作为缓冲体系用于生物制剂的生产、储存与运输,稳定体系pH,同时作为重要医药中间体,其参与多种药物的制备与复配。

2.临床应用:可用于纠正代谢性酸中毒与呼吸性酸中毒等血液酸碱失衡相关病症。

 

四、配制方法

  

(以配制1 L的1 M Tris-HCl为例)

1.计算Tris用量

所需Tris的用量=1 mol/L×1 L×121.14 g/mol=121.14 g,即需称取121.1 g Tris

2.溶解Tris

将称好的Tris加入烧杯中,并加入800 mL去离子水搅拌至完全溶解

3.调节pH值

向溶解完全的Tris溶液中,逐滴加入浓HCl调至目标pH(注:边加边搅拌,具体量以pH计为准)

4.定容

将溶液转移至1 L容量瓶,并定容至1 L刻度线,混匀后,再次使用pH计确认pH值。

5.保存

室温/4℃保存,避免吸收CO2,长期保存建议分装。

 

自配Tris-HCl缓冲液所需相关产品详情见下表

产品货号

产品名称

产品特点

60102ES

Tris Base 三(羟甲基)氨基甲烷

粉末型,配制灵活

60113ES

Tris-HCl 三(羟甲基)氨基甲烷盐酸盐(超纯)

粉末型,pH 4.2-4.9,配制便捷

60168ES

Sterile Deionized Water (PCR Grade) 无菌去离子水(PCR级)

即用型,0.1 μm过滤除菌,不含RNase和DNase

 

另外,我司提供即用型Tris-HCl缓冲液系列产品,相关产品详情见下表

产品货号

产品名称

产品特点

常见应用场景

60156ES

1 M Tris-HCl Buffer (pH 6.8) 1 M Tris-HCl 缓冲液(pH 6.8)

液体型,开瓶即用

配制SDS-PAGE浓缩胶或native PAGE的上层胶,及其它实验试剂配制

60177ES

1 M Tris-HCl Buffer (pH 6.8, Sterile) 1 M Tris-HCl 缓冲液(pH 6.8,无菌)

液体型,开瓶即用,无菌

 

60178ES

1 M Tris-HCl Buffer (pH 7.6, Sterile) 1 M Tris-HCl 缓冲液(pH 7.6,无菌)

偏生理pH,可用于对磷酸根敏感的实验和作为中性抗原修复液

60179ES

1 M Tris-HCl Buffer (pH 8.0, Sterile) 1 M Tris-HCl 缓冲液(pH 8.0,无菌)

分子生物学中最常用,可配制TE缓冲液,适合核酸样品长期储存、核酸提取后重悬和各种核酸酶反应缓冲液,以及His-tag 蛋白镍柱纯化等

60180ES

1 M Tris-HCl Buffer (pH 8.8, Sterile) 1 M Tris-HCl 缓冲液(pH 8.8,无菌)

配制SDS-PCR、qPCR、NGS文库构建等下游分析前的样品准备PAGE分离胶或native PAGE的下层胶,及其它实验试剂配制

60181ES

1.5 M Tris-HCl Buffer (pH 8.8, Sterile) 1.5 M Tris-HCl 缓冲液(pH 8.8,无菌)

60172ES

1 M Tris-HCl Buffer (pH 8.5,Sterile,DNase free) 1 M Tris-HCl缓冲液(pH 8.5,无菌,无DNA酶)

液体型,开瓶即用,无菌,无DNA酶

要求无DNA酶污染的生化、分子生物学等实验,也可用于要求无菌的细胞培养等相关溶液的配制

 

五、常见问题

  

Q1:Tris和Tris Base是同一种物质吗?

A1:是的,Tris水溶液显碱性,故而也被叫做Tris Base。

 

Q2:Tris浓度越高,缓冲能力越强吗?

A2:缓冲能力核心取决于pH与pKa的匹配度,pH=pKa时缓冲能力最强;过高浓度的Tris会带来高渗透压、细胞毒性、酶活抑制。

 

更多缓冲液产品详情见官网:实验室常用水溶液及细胞培养试剂选购指南

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