CRISPR基因编辑实验受阻？优质 Cas 蛋白是突破瓶颈的关键
9000
2026-01-07
自 2012 年首次亮相以来，CRISPR 技术凭借其高效精准的特性，已在基因功能研究、药物靶点筛选、遗传疾病治疗、癌症研究以及作物育种等多个领域取得突破性成果，成为推动生命科学发展的核心技术之一。
图1. CRISPR-Cas9介导的基因编辑机制[1]
然而，在实际实验操作过程中，众多研究者常常遭遇各类技术难题，导致实验进度受阻。CRISPR 实验中最为常见的痛点主要包括以下几方面：
-
细胞毒性高：转染后细胞存活率低，难以获取足量且有效的实验样本，直接影响后续研究开展；
-
编辑效率低：目标位点的编辑成功率低，阳性克隆筛选困难，耗时耗力；
-
脱靶风险高：非目标位点易出现随机编辑情况，严重影响实验结果的准确性与可靠性，可能导致研究结论出现偏差。
深入探究这些痛点的根源，不难发现其与 Cas 蛋白的质量息息相关。纯度不达标的 Cas 蛋白易残留核酸酶、内毒素等杂质，正是引发细胞毒性高、编辑效率低、脱靶风险高等问题的核心原因[3]。
针对上述痛点，我司依托永利3044集团官网发酵与纯化工艺开发平台、酶分析及质控平台，并结合UCF.ME® 超洁净酶生产平台，以严苛标准打造高纯度 Cas 蛋白系列产品，通过多维度、全方位的系统化质控流程，从源头保障产品品质。
以下为核心产品 Cas9 Nuclease（Cat#14701ES）的详细参数，其各项指标均展示了严格质控下的卓越品质：
|
产品名称及货号 （Product Name and Catalog Number） |
Cas9 Nuclease（Cat#14701ES） |
|
表达系统（Source） |
E.coli |
|
种属（Species） |
Streptococcus pyogenes |
|
分子量大小（Molecular Weight） |
163 kDa. |
|
浓度（Concentration） |
10 mg/mL |
|
纯度（Purity）(Bis-Tris PAGE) |
≥95% |
|
内毒素（Endotoxin） |
＜10 EU/mg |
|
E.coli菌体蛋白质（E.coli host protein） |
<0.1 ppm |
|
大肠埃希菌菌体DNA（E.coli host DNA） |
<3 ng/mL |
|
支原体检查（Mycoplasma examination） |
阴性（Negative） |
|
核酸外切酶（Exonuclease） |
阴性（Negative） |
|
切口酶（Nickase） |
阴性（Negative） |
|
RNase酶（RNase） |
阴性（Negative） |
|
磷酸酶（Phosphatase） |
<0.0001 U |
Cas9 Nuclease产品性能数据展示
A：体外切割测试：3批次体外切割活性均达98%以上。
B：体内基因敲除，敲除效率与进口品牌一致。
图2. Cas9 Nuclease体外切割活性及基因敲除效率结果
除核心 Cas9 蛋白外，永利3044集团官网还构建了覆盖基因编辑全流程的完整解决方案，产品体系贯穿 CRISPR 核心组件制备至效果检测全环节，全方位满足不同科研场景的多样化需求。
全系列高品质产品推荐
|
产品应用 |
产品定位 |
产品名称 |
产品货号 |
|
通用型 |
带NLS的SpCas9 |
14701ES |
|
|
荧光观察/流式分选 |
带EGFP荧光标签的SpCas9 |
11364ES |
|
|
基因调控 |
无剪切酶活性的Cas9 |
11351ES |
|
|
小分子量递送 |
Cas12a |
14702ES |
|
|
Cas12b |
14808ES |
||
|
sgRNA制备 |
sgRNA合成 |
11355ES |
|
|
sgRNA纯化 |
12602ES |
参考文献
[1] Westermann L, Neubauer B, Köttgen M. Nobel Prize 2020 in Chemistry honors CRISPR: a tool for rewriting the code of life. Pflugers Arch. 2021 Jan;473(1):1-2.
[2] The Nobel Prize in Chemistry 2020, Retrieved October 7, 2020, from https://www.nobelprize.org/prizes/chemistry/.
[3] Pacesa M, Pelea O, Jinek M. Past, present, and future of CRISPR genome editing technologies[J]. Cell, 2024, 187(5): 1076-1100.
[4] Marraffini LA, Sontheimer EJ. CRISPR interference: RNA-directed adaptive immunity in bacteria and archaea. Nat Rev Genet. 2010;11(3):181-190.
[5] Makarova KS, Wolf YI, Iranzo J, et al. Evolutionary classification of CRISPR-Cas systems: a burst of class 2 and derived variants. Nat Rev Microbiol. 2020;18(2):67-83.
[6] Pickar-Oliver A, Gersbach CA. The next generation of CRISPR-Cas technologies and applications. Nat Rev Mol Cell Biol. 2019;20(8):490-507.
[7] Jiang F, Doudna JA. CRISPR-Cas9 Structures and Mechanisms. Annu Rev Biophys. 2017;46:505-529.
