为什么是单峰,但 Tm 在 80℃之前?
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2026-08-24
可能原因:
扩增产物是完全的引物二聚体,可能是未加模板。
注:若 microRNA,则结果正常(做 microRNA 定量时存在引物二聚体。micro RNA 反转录后定量, 产物在 80-90bp 左右,峰对应 Tm 值为 70-80℃,若有引物二聚体存在,引物二聚体大小只有几十bp,峰对应 Tm 值也在 70-80℃之间。故会在 80℃以前出现双峰)。
解决方案:
进行高分辨率琼脂糖电泳,检测有无目的条带,以确定模板是否加入。优化方法:新配制无误的反应体系,重新实验。
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